[发明专利]快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法及其应用有效
| 申请号： | 201610723650.8 | 申请日： | 2016-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN106167828A | 公开（公告）日： | 2016-11-30 |
| 发明（设计）人： | 戴祖云;高秀武;王雯雯;赵传奇 | 申请（专利权）人： | 安徽江淮园艺种业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 230031 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法及其应用，涉及南瓜杂交种的纯度鉴定技术领域。该方法包括以下步骤：A、提取南瓜杂交种子的DNA；B、以提取的DNA作为模板，配制聚合酶链式反应PCR体系，利用SSR引物对提取出的DNA进行PCR扩增；PCR扩增的反应条件为：94℃～96℃变性2～20s，60℃退火2～20s，72℃延伸5～20s，33～35个循环，得到PCR扩增产物；C、将PCR扩增产物进行电泳分离；D、根据电泳分离出的条带，计算种子纯度。本发明能够将现有的PCR所需时间缩短75.7％，大幅提高SSR方法测定种纯的速度，能够满足大批量生产，且无需使用昂贵进口仪器，从而大幅降低早期投入与后期生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 鉴定 南瓜 杂交种 纯度 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取南瓜杂交种子，分别提取每一粒种子中的DNA；B、以每一粒种子所提取的DNA作为模板，各配制一份聚合酶链式反应PCR体系，利用SSR引物对提取出的DNA进行PCR扩增；所述PCR扩增的反应条件为：94℃～96℃变性2～20s，60℃退火2～20s，72℃延伸5～20s，33～35个循环，得到PCR扩增产物；C、将PCR扩增产物在琼脂糖凝胶中进行电泳分离；D、选取的南瓜杂交种子中，有一部分父本、母本种子，根据电泳分离出的条带，判断杂交种、父本、母本，计算种子纯度；杂交种纯度的计算公式为：杂交种的数量/测定的种子总数×100％。
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