[发明专利]一种多功能靶向纳米胶囊抗癌药物的制备方法

摘要

本发明提出了一种新型多功能靶向纳米胶囊抗癌药物的分子设计与合成技术，利用羧基化的嵌段共聚物F127‑COOH和P123将紫杉醇包裹形成纳米胶束，并使用四甲氧基硅烷在胶束中形成一层二氧化硅壳稳定胶束结构以形成载药纳米胶囊；然后通过偶联剂将纳米胶囊表面的羧基与TRAIL蛋白表面的氨基偶联，形成表面偶联TRAIL蛋白的载药纳米胶囊。本发明的技术方法重复性好、条件温和，制备的多功能靶向纳米胶囊抗癌药物稳定，抗癌谱广且疗效显著。

主权项

1.一种多功能靶向纳米胶囊抗癌药物的制备方法，其特征在于：该制备方法包括如下步骤：（1）嵌段共聚物F127的羧基化修饰将F127加入到无水甲苯中，搅拌至F127完全溶解，形成溶液A；向溶液A中加入与F127等重的丁二酸酐，搅拌后形成溶液B；将溶液B在150℃下沸浴加热5h，减压下蒸馏将甲苯蒸发，蒸馏后残液用二氯甲烷洗涤，然后加入乙醚沉淀产物，产物用乙醚重结晶，最后得到F127‑COOH；所述F127与无水甲苯的质量体积比为1:1，质量体积比单位为mg:ml；（2）载药纳米胶囊的制备称取P123和F127‑COOH超声溶解于氯仿溶液，并加入紫杉醇，100 W超声分散15 min，得到的混合溶液在75℃下真空干燥1 h以上，待氯仿完全蒸发完后得到一层纳米薄膜，向薄膜内加入去离子水，200 W超声分散12 min即得到包载紫杉醇的载药纳米胶束；取四甲氧基硅烷超声分散于四氢呋喃溶液中，逐滴加入到载药纳米胶束中，并置于磁力搅拌仪上以750 rpm转速搅拌3天，四甲氧基硅烷在胶束中水解形成一层二氧化硅壳，形成载药纳米胶囊；所述P123与F127‑COOH的质量比为2:1‑0.5, 紫杉醇与P123、F127‑COOH混合物的质量比为1:70‑300；所述的四甲氧基硅烷与四氢呋喃的用量为：四甲氧基硅烷与四氢呋喃的体积比为7:100，四甲氧基硅烷与载药纳米胶束的体积比为1:100‑1000；（3）载药纳米胶囊与TRAIL蛋白的偶联在磷酸盐缓冲液（PBS）中加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）、N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）以及载药纳米胶囊，室温避光旋转反应1 h活化胶囊表面的羧基；将反应后的溶液装入截留分子量为8000 g/mol的透析袋，置于PBS溶液中透析24 h以除去未反应的EDC和NHS，再向透析后的溶液中加入TRAIL蛋白，4℃避光旋转反应8‑16 h，即得到偶联TRAIL蛋白的载药纳米胶囊；所述磷酸盐缓冲液、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺、载药纳米胶囊的用量比为3:5:6:1,单位为ml:mg:mg:ml；所述TRAIL蛋白用量与载药纳米胶囊用量比为1:10‑40；单位为mg:ml。