[发明专利]一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞体外微核影响的方法在审
| 申请号： | 201610728015.9 | 申请日： | 2016-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN106244662A | 公开（公告）日： | 2016-12-21 |
| 发明（设计）人： | 高茜;夭建华;黄海涛;米其利;李雪梅;倪红梅;唐萍;朱洲海;管莹 | 申请（专利权）人： | 云南中烟工业有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京权泰知识产权代理事务所(普通合伙)11460 | 代理人： | 任永利 |
| 地址： | 650231 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞体外微核影响的方法，包括以下步骤：(1)将待测胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(2)将冷冻的胶基型烟草制品立即用粉碎机将其粉碎；(3)再次冷冻；(4)将碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡；(5)将提取液离心分离；(6)用渗透压测定仪测定上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将提取液加入到培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过培育后，用高内涵成像仪检测细胞体外微核情况。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 胶基型 烟草 制品 人口 细胞 体外 影响 方法 | ||
【主权项】：
一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞体外微核影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待测的所述胶基型烟草制品置于液氮中冷冻20‑40min；(2)将步骤(1)冷冻的所述胶基型烟草制品，立即用粉碎机将其粉碎，收集粉碎后的碎末胶基型烟草制品；(3)再次将所述碎末胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(4)将步骤(3)得到的所述碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡20‑40min，每隔2‑5min搅动一次；所述人工唾液的温度为36‑38℃；(5)将步骤(4)得到的提取液离心分离5‑10min；(6)用渗透压测定仪测定步骤(5)得到的上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致，得到胶基型烟草制品提取液；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将步骤(6)中获得的胶基型烟草制品提取液加入到步骤(8)中培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过不超过于24小时的培育后，用高内涵成像仪检测细胞体外微核情况。
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