[发明专利]一种分离制备天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷的方法

摘要

本发明公开了一种分离制备天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷的方法，所述方法以草莓为原料，通过冷冻干燥、醇提浓缩、分级萃取、AB‑8大孔树脂吸附纯化，制备得到草莓花色苷提取物，最后利用高速逆流色谱从草莓花色苷提取物中分离纯化得到高纯度的天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷，其纯度大于98％。通过使用本发明的方法可以从1000g的草莓冻干粉中获得710mg的天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷，其纯度和得率相对于传统的分离方法得到了提升，且工艺简单，使之能够实现工业化生产。

主权项

一种分离制备天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷的方法，包括以下步骤：(1)草莓冻干粉制备：将新鲜草莓洗净，冷冻干燥，磨成粉；(2)花色苷提取：草莓冻干粉与乙醇溶液混合后超声提取，过滤，得到的滤渣重复提取一次，合并滤液，在40‑45℃下真空旋转蒸发除去乙醇，得到花色苷粗提液；(3)分级萃取：依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，合并水相，40‑45℃真空旋转蒸发除去残留的氯仿和乙酸乙酯，得到花色苷上样液；(4)大孔树脂吸附：将所述花色苷上样液注入大孔树脂中，先用去离子水以冲洗树脂，再用含0.01％(v/v)盐酸的甲醇溶液洗脱，收集红色明显的洗脱液，在40‑45℃下真空旋转蒸发除去甲醇，得到花色苷浸膏，将所述浸膏用少量的去离子水溶解，之后冷冻干燥得到花色苷冻干粉；(5)高速逆流色谱制备单体将正丁醇：甲基叔丁基醚：乙腈：水：三氟乙酸按体积比为2：2：1：5：0.01置于分液漏斗中配制两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱的螺旋管道；在25℃下，主机正转，将流动相以3mL/min泵入，至两相溶剂在管道中达到平衡状态后；将样品用流动相溶解后，进样，在紫外检测器下检测，收集目标组分即可得到天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷。