[发明专利]一种利用恶臭假单胞菌制备烟酸的方法

摘要

本发明涉及生化技术领域，特别是大型工业生产中的一种利用恶臭假单胞菌制备烟酸的方法，其包括：发酵、膜过滤、水解、膜过滤、脱色、结晶、离心、干燥、包装各步骤。本发明的有益效果是：本发明采用微生物发酵生产烟酸，具有反应条件温和、选择性好、流程简单、产物产率和纯度高、成本低、环境污染小等优点，而且对部分废水进行了回收利用，增加了附加产值，特别适合用于大规模的生产。

主权项

一种利用恶臭假单胞菌制备烟酸的方法，其特征在于，包括以下步骤，(1) 发酵：在发酵罐中加入为发酵罐容积70‑90%的培养基，所述培养基包括以下质量百分数的组成：0.1‑2%酵母粉，1‑3%蛋白胨、0.1‑2%NaCl、0.1‑2%KH₂PO₄、0.1‑2%K₂HPO₄·3H₂O、0.1‑2%尿素、1‑4%甘油、其余为水；然后灭菌，接入1‑10%的恶臭假单胞杆菌，培养20‑40h，期间不断通无菌空气，发酵过程中控制温度为20‑50 ℃，通过流加稀盐酸和氨水调节pH为6‑9，后期流加甘油；(2) 膜过滤将步骤(1)发酵完成后的混合物通过微滤设备进行过滤，滤膜孔径为0.01‑0.1μm，收集滤渣，滤渣主要成分为腈水解酶高产菌株和睛水解酶；(3) 水解将滤渣和pH6‑9的KH₂PO₄‑K₂HPO₄缓冲液加入反应釜中，加至过滤前混合物的体积，控制反应温度为20‑40 ℃，缓慢流加3‑氰基吡啶进行水解反应，用液相色谱跟踪3‑氰基吡啶的残留量；(4)膜过滤将水解反应后的水合液通入微滤设备进行过滤，滤膜孔径为0.01‑0.1μm，得到的滤液和滤渣，滤液加入反应液接收罐，滤液为烟酸铵溶液，滤渣为反应后的废细胞及微量的3‑氰基吡啶；(5) 脱色将步骤（4）的滤液通过脱色膜机进行膜过滤，滤膜孔径为100‑500道尔顿，利用膜过滤去除滤液中的杂质和色素；(6)结晶将步骤（5）得到的滤液加入结晶釜，搅拌，缓慢流加20‑50%的稀硫酸至pH为2‑5，期间结晶釜温度控制在20‑40℃，烟酸铵和稀硫酸反应生成烟酸晶体；(7) 离心、干燥、包装将步骤（6）生产的混合液放入离心机进行离心、洗涤，得到母液和烟酸结晶体，烟酸结晶体进入流化床进行干燥，干燥至水分含量低于0.5%，进行包装。