[发明专利]一种扩增BRCA1/2基因的多重PCR引物及一种多重PCR引物的设计方法有效
| 申请号： | 201610737156.7 | 申请日： | 2016-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN106367481B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 张纪斌;王辉云;林钊;李伟琴;罗景燕;赖炳权 | 申请（专利权）人： | 广州永诺健康科技有限公司;广州永诺生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11;C40B40/08 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种扩增BRCA1/2基因的多重PCR引物及一种多重PCR引物的设计方法，所述多重PCR引物包括SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:234所示的核苷酸序列。本发明还提供了一种多重PCR引物的设计方法。本发明提供的多重PCR引物可以快速的完成BRCA1/2目标序列的富集，进而进行NGS文库构建和测序，实现高度自动化、高通量的遗传性乳腺癌BRCA1/2基因检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 扩增 brca1 基因 多重 pcr 引物 设计 方法 | ||
【主权项】：
1.一种多重PCR引物的设计方法，其特征在于，所述设计方法包括以下具体步骤：(1)使用引物设计软件设计目标区域的引物库，将目标区域分割成多个小目标区域，所述目标区域为BRCA1/2基因的编码外显子和外显子‑内含子边界10碱基，所述小目标区域的长度控制在200bp以内，然后针对每个小目标区域设计多对引物，构成所述引物库；(2)对步骤(1)设计的引物库中的引物进行筛选，保留特异性强、不包含简单重复序列和不存在高频SNP位点的引物；(3)对于步骤(2)中保留的引物中扩增相同小目标区域的引物，挑选引物设计软件中分值最高的一对引物；(4)在步骤(3)中获得的引物中挑选满足“引物间相互作用最小化”的原则的引物，即得所述多重PCR引物；其中所述“引物间相互作用最小化”的原则为：引物和引物之间3’末端碱基互补数不高于10，引物和引物之间整体互补率不高于75％。
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