[发明专利]一种大鼠劳损性膝骨关节炎模型建立的方法

摘要

本发明涉及一种大鼠劳损性膝骨关节炎模型的建立方法，该方法结合关节急性或慢性生物力学作用这首要危险因素，对临床劳损性膝骨关节炎发病过程进行高效模拟，建立了一种和临床膝骨关节炎发病机理相似的新型动物模型，即仅给予实验大鼠前交叉韧带横断术，而未切除大鼠半月板，高度维持了大鼠膝关节微环境的代谢调节和应力作用，在建立大鼠膝关节不稳模型的基础上，同时使其处于强迫直立负重状态并给予一定强度的跑步运动负荷，结合上坡运动方式增加关节应力作用，模拟膝关节软骨长期劳损，建立膝骨关节炎动物模型，探索该方法的成模效率及不同时期膝骨关节炎模型造模所需要的大致时间，为进一步研究该病的机制及治疗手段奠定基础。

主权项

一种大鼠劳损性膝骨关节炎模型建立的方法，其特征在于：所述模型建立的方法如下：第一步：大鼠称重后，按0.5ml/100g剂量腹腔内注射7%水合氯醛麻醉，观察记录大鼠呼吸情况；选取右膝关节，备皮，络合碘消毒，酒精脱碘，用小尖刀沿髌韧带内侧缘切开皮肤，切口为2.0～3.0cm;再用眼科剪打开关节囊，钝性分开髁间窝处的脂肪垫组织以暴露髁间窝直致可以肉眼观察到内侧副韧带、前交叉韧带；术中少量出血，用无菌纱布按压止血，使手术视野更佳清晰，同时用生理盐水浸湿的纱布保持关节腔内湿润，将髌骨向外侧脱位，以扩大手术视野，尽量屈曲膝关节显露前交叉韧带，在直视下切断前交叉韧带，行抽屉试验确认前交叉韧带是否已完全切断；第二步：手术创口使用无菌生理盐水冲洗干净后，用纱布处理手术部位，将外脱位的髌骨复位，行双层缝合，用4.0可吸收线独立缝合关节囊，以5.0丝线间断缝合伤口；术后一次性肌注青霉素1ml抗感染，4万U/ml，待SD大鼠清醒后按10mg/kg曲马多止痛，再将SD大鼠按编号分笼后，放回清洁动物室，让其自由活动及进食；第三步：术后三天，大鼠疼痛缓解后，在实验动物跑台上适应性运动三天，跑步时使用自制束缚带交叉法束缚其胸部牵引使其直立于跑步机上，前肢支撑于横栏上，并在其前方放置食物和设置黑洞，利用其趋食和避光的习性自主向前运动，每只大鼠每天运动30min，速度为15～20m/min，即每天为450～600m；第四步：适应性运动结束后，根据实验需求建立早期、中期和晚期骨性关节炎模型；即2周单次劳损运动方案为骨性关节炎早期模型、2周双次劳损运动方案为骨性关节炎中期模型、4周劳损运动方案为骨性关节炎晚期模型；让所述2周单次劳损运动方案为大鼠每天下午5点运动一次，共运动2周；2周双次劳损和4周劳损运动方案为每天相同的两个时段，上午9点和下午5点各运动一次，40min/次，6天/周，分别运动2周和4周；动物跑台的上倾坡度均为12度，速度为25～30m/min，每周分别运动距离为12000m～14400m。