[发明专利]一种大规模分离纯化特立帕肽（Teriparatide）的方法

摘要

本发明涉及一种利用反相高效液相色谱大规模分离纯化特立帕肽的一种方法，包括以下步骤：特立帕肽粗品溶解在30%乙腈水溶液中，超声处理，滤膜过滤，取滤液待用；使用高效液相色谱仪器对过滤后的粗品进行分离纯化；将浓缩液经过反相柱换盐转成醋酸盐；将转好醋酸盐且纯度99%以上产品进行减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，得到粉末状产品，经检测合格即为最终产品。该方法操作方便，无需过多的生成设备；所得产品纯度高且生产收率高，产品纯度达到99%以上，纯化回收率达到60%以上；此工艺可满足大规模工业化生成的需求。

主权项

一种大规模分离纯化特立帕肽的方法，包括以下步骤：1）样品处理：将特立帕肽粗品溶解在30%乙腈水溶液中，超声处理，滤膜过滤，取滤液待用；2）纯化：a、纯化条件：通过DAC‑CXTH200制备动态轴向加压柱，流动相A为醋酸铵缓冲溶液，用醋酸或氨水调pH；流动相B为乙腈，进行流动相梯度洗脱分离纯化，流速为700‑1000ml/min，检测波长为220nm，分段收集目的峰；b、纯化过程：将色谱柱用流动相A平衡，上样品溶液，线性梯度洗脱60min，收集目的峰；将分离纯化后纯度99%以上高浓度目的肽溶液于不超过40℃的水温下进行减压旋蒸浓缩，浓缩后至约20‑40mg/ml后备用；3）转盐：将步骤2）中得到的浓缩液经过反相动态轴向加压柱完成离子交换转成醋酸盐；具体过程为：将色谱柱用流动相A平衡后上样，醋酸铵水溶液冲洗柱子3个柱体积，每一个柱体积约8分钟；最后用占本次冲洗体积总量50%的质量百分浓度0.1%醋酸乙腈溶液，把样品冲洗下来；4）样品终处理：收集转好醋酸盐的肽溶液进行减压旋蒸浓缩至30‑40mg/ml，得到纯度99%以上产品，再经过冷冻干燥，得到粉末状产品，经检测合格即为最终产品。