[发明专利]一种纵隔恶性畸胎瘤检测胶体金免疫层析试纸及其制备方法

摘要

本发明提供了一种纵隔恶性畸胎瘤检测胶体金免疫层析试纸，所述试纸由以下步骤制备而得（1）制备胶体金‑AFP和胶体金‑LDH抗体复合物；（2）制备双抗体夹心试纸a,制备结合垫以玻璃纤维膜为材料，将其剪切成备选的规格，备用；b，制备样品吸收垫将样品吸收垫用PBS缓冲液浸泡12h，烘干备用；c，硝酸纤维膜的制备在硝酸纤维素膜上用滑膜仪依次在不同位置划出检测线1、检测线2和质控线，所述检测线1包被有胶体金‑AFP抗体复合物，所述检测线2包被有胶体金‑LDH抗体复合物，所述质控线包被有羊抗兔单克隆抗体，备用；d，试纸的组装将样品吸收垫、结合垫、硝酸纤维膜、吸水垫依次粘贴在PVC底板上，40℃下干燥处理40min后切成2cm宽的试纸条。

主权项

一种纵隔恶性畸胎瘤检测胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述试纸由以下步骤制备而得：(1)制备胶体金‑AFP和胶体金‑LDH抗体复合物：取胶体金溶液分成均等两份，记为第一份、第二份，调节pH在6‑8，将AFP单克隆抗体以1:130的体积比加入到第一份胶体金溶液中，将LDH单克隆抗体以1:150的体积比加入到第二份胶体金溶液中，震荡使单克隆抗体与得以标记，再分别加入质量浓度为5％的胎牛血清，最后浓度分别为1.2％和1.5％，两份溶液4℃下先低速离心10min，取上清液再高速离心50min处理，弃去上清液，将沉淀物用硼酸盐缓冲液溶解离心2次，所得离心沉淀物溶解于硼酸盐缓冲液中，溶解量使其达到原体积，再次离心后所得上清液浓缩成原体积的1/12，4℃下保存，即得到所述胶体金‑AFP和胶体金‑LDH抗体复合物。(2)制备双抗体夹心试纸：a,制备结合垫：以玻璃纤维膜为材料，将其剪切成备选的规格，备用；b，制备样品吸收垫：将样品吸收垫用PBS缓冲液浸泡12h，烘干备用；c，硝酸纤维膜的制备：在硝酸纤维素膜上用滑膜仪依次在不同位置划出检测线1、检测线2和质控线，所述检测线1包被有胶体金‑AFP抗体复合物，所述检测线2包被有胶体金‑LDH抗体复合物，所述质控线包被有羊抗兔单克隆抗体，备用；d，试纸的组装：将样品吸收垫、结合垫、硝酸纤维膜、吸水垫依次粘贴在PVC底板上，40℃下干燥处理40min后切成2cm宽的试纸条。