[发明专利]一种嗜菌异小杆线虫在温室蔬菜地下害虫生防中的应用

摘要

本发明公开一种嗜菌异小杆线虫在温室蔬菜地下害虫生防中的应用，通过分离得到嗜菌异小杆线虫，采用新鲜的鸡内脏或去除鸡胗和胆，加入20％w/v的水，10%‑20%的植物油，均质、灭菌后作为培养基培养繁殖昆虫病原线虫，配置成10000Ijs每株幼苗的线虫悬浮液，灌根于幼苗根部，在施用后蚊蝇幼虫致死率100%，大型地下害虫蛴螬、蝼蛄等的致死率达到50%以上，具有无毒绿色和一次施用长效保持的作用效果，并且由于其具有主动搜索和再扩繁的能力，对于地下难于防治的害虫幼虫其具有其他药剂难于企及的作用效果，对于绿色、健康温室蔬菜的生产具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种利用嗜菌异小杆线虫尼勒克品系(Heterorhabditis bacteri-ophorastrainNileke)在蔬菜生防中的应用，其特征在于，具体应用步骤如下：/n(1)采用新鲜的鸡内脏或去除鸡胗和胆，或采用羊、猪肝脏，加入20％w/v的水，10％-20％的植物油，在均质机中搅碎均质混匀，去除大颗粒后与1厘米见方的海绵按质量比1：8至1：10的比例均匀混合，然后装瓶灭菌作为培养基培养繁殖嗜菌异小杆线虫；/n(2)选用1.3L的组培聚丙烯耐高温组培瓶，装入量控制在1L，使海绵块有摇动的空间，然后经121度30分钟高温蒸汽灭菌，灭菌完成后，待固体培养基温度降到40℃以下时，把经过36小时培养准备好的一型共生菌悬液按每瓶3mL的量在无菌条件下接入培养瓶中，盖紧瓶盖后上下左右摇动数次，放置于避光20-26℃条件下培养3天，期间每天上下左右摇动两次，然后每瓶接入5000IJS/ml表面消毒的侵染期线虫5ML，放置于避光25℃条件下培养2周；即可在瓶壁上看到白色的侵染期线虫-嗜菌异小杆线虫；/n(3)取上述步骤增殖完成的培养瓶中所有内容物倒入上层有40目筛网下层密封水层没过筛网底部的收集盒中过夜收集后，多次沉淀清洗，直至在体视显微镜下90％以上为侵染期线虫，最终稀释为1000IJs/ml的嗜菌异小杆线虫悬浊液后按体积比1％加入福尔马林溶液，10-20℃条件下密封保存制备嗜菌异小杆线虫喷洒液备用；/n(4)将上述步骤制备的嗜菌异小杆线虫喷洒液施用在温室蔬菜地下害虫防治中，以育苗初期或定殖苗后按每株幼苗10000IJS的量灌根于幼苗根部，并且可与非刹线虫生物杀虫剂混合使用，在使用期间，除刹线虫制剂严禁使用外，其余杀菌杀虫制剂均可正常使用，但对温室土壤温度要控制在30℃以下。/n