[发明专利]一种A群C群脑膜炎球菌多糖的纯化方法在审
申请号: | 201610745741.1 | 申请日: | 2016-08-29 |
公开(公告)号: | CN106117388A | 公开(公告)日: | 2016-11-16 |
发明(设计)人: | 吴强;陈元芬;王宇 | 申请(专利权)人: | 成都欧林生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种A群C群脑膜炎球菌多糖的纯化方法,包括以下步骤:(1)将脑膜炎球菌进行发酵培养并进行杀菌处理,得到已杀菌的培养液;(2)脑膜炎球菌荚膜多糖制备;(3)将粗制多糖溶进行层析洗脱,收集含有多糖的目标峰,再将收集的多糖溶液以注射用水为超滤液,用超滤膜包进行脱盐,脱盐后的溶液即为A群C群脑膜炎球菌多糖溶液,其中缓冲液A为20mM Tris‑HCl,0.5%脱氧胆酸钠,pH 8.0;缓冲液B为20mM Tris‑HCl,pH 8.0。本发明创造性的采用了层析法,避免了传统纯化方法中对苯酚的大量使用,在保证了纯化质量的基础上,有效的避免了苯酚对环境的破坏,并且多糖回收率与传统苯酚抽提法相近,操作简单,适合大规模生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 脑膜炎 球菌 多糖 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种A群C群脑膜炎球菌多糖的纯化方法,其特征在于,将粗制多糖溶解于缓冲液A中,溶解后的粗制多糖经澄清过滤后,上样于用缓冲液预先平衡好的DEAE‑Sepharose Fast Flow层析柱,收集未吸附的流穿峰,然后上样于以缓冲液B预先平衡好的Capto Adhere层析柱,以缓冲液B作为流动相进行洗脱,收集含有多糖的目标峰,再将收集的多糖溶液以注射用水为超滤液,用超滤膜包进行脱盐,脱盐后的溶液即为A群C群脑膜炎球菌多糖溶液,其中缓冲液A为20mM Tris‑HCl,0.5%脱氧胆酸钠,pH 8.0;缓冲液B为20mM Tris‑HCl,pH 8.0。
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