[发明专利]一种绞股蓝组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种绞股蓝组培快速繁殖方法，通过无性快繁技术快速获得大量绞股蓝优良品种木苗的方法。本发明以绞股蓝单芽茎段为外植体，经过外植体消毒、芽初代诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗及移栽等步骤建立了绞股蓝组织培养快繁技术体系，为今后绞股蓝组织培养繁殖苗木，加速良种繁育满足市场需求提供技术支持。

主权项

一种绞股蓝组培快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1，外植体处理及消毒：选取健壮绞股蓝单芽茎段作为外植体，先用去污粉水浸泡15min，再用毛刷刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用流水下冲洗6h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒35s后用无菌水洗8次，再用0.1%升汞溶液消毒30min，用无菌水冲洗8次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；步骤2，芽初代诱导培养：将步骤（1）处理后的绞股蓝单芽茎段切成3.5cm小段并接种到诱导培养基上,先在29℃条件下全暗培养6天，然后每天光照9小时，光照强度为3500lx，直至诱导形成丛生芽；步骤3，增殖培养：将步骤（2）培养获得的丛生芽长至约3.5cm时分切至增殖培养基上进行继代培养，接种后先在29℃条件下全暗培养5天，然后置于每天光照18小时，光照强度为3000lx，置于培养温度为29℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，得到丛生芽；步骤4，生根培养：将步骤（2）或（3）过程获得的高度约为3.5cm的丛生芽芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在29℃条件下全暗培养9天，然后置于每天光照18小时，光照强度为3300lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根；步骤5，炼苗移栽：将步骤（4）获得的高约8cm、生长健壮、根系粗壮、叶色浓绿的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗8天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由营养土:蛭石:沙土＝2:2:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度，待幼苗成活后再移栽大田，小苗移栽后选择透光率为90%的遮阴处理。