[发明专利]黄瓜抗蔓枯病渐渗系HH1‑8‑1‑2的培育方法及抗性基因位点分子标记

摘要

本发明属于生物技术育种领域，涉及黄瓜抗蔓枯病渐渗系材料的培育方法。通过该材料获得黄瓜抗蔓枯病分子标记，专用于黄瓜抗蔓枯病分子辅助育种。本发明通过野生种与栽培种的种间杂交，染色体加倍后获得异源四倍体新种，经回交、自交，获得种间渐渗系。通过接种鉴定发现渐渗系HH1‑8‑1‑2的病情指数为24.6，表现为抗病。抗蔓枯病基因QTL位点与标记SSR17406紧密连锁。本发明成功选育了黄瓜抗蔓枯病渐渗系材料，该材料农艺性状优良，可作为育种材料。通过本发明提供的黄瓜抗蔓枯病基因QTL位点的分子标记检测HH1‑8‑1‑2的衍生品种(系)中是否含有该基因位点，可预测其抗性，提高选择效率，加速选育进程。

主权项

黄瓜抗蔓枯病渐渗系材料HH1‑8‑1‑2的培育方法，其特征在于包含如下步骤：1)黄瓜‑酸黄瓜渐渗系的获得：以野生种酸黄瓜为母本，栽培黄瓜“北京截头”为父本杂交获得杂交种F₁，杂交种F₁通过胚胎拯救及体细胞无性系变异染色体加倍技术，获得异源四倍体新种，命名为Cucumis hytivus，以Cucumis hytivus为母本，与“北京截头”通过系统回交和自交选育，获得一系列携带有野生种染色体片段的黄瓜‑酸黄瓜渐渗系；2)黄瓜‑酸黄瓜渐渗系抗蔓枯病接种鉴定：接种鉴定参照Zhang等，1997的方法。制备接种孢子悬浮液的浓度为1×10⁶个/mL，接种步骤1)获得的黄瓜‑酸黄瓜渐渗系幼苗。接种后保持相对湿度95％～97％，温度控制在25℃左右。接种7d统计叶部病级，按如下公式计算病情指数：病情指数＝∑(病级×该病级株数)/(最高病级×调查总株数)×100参考方中达，1998的方法，叶部病指≤15为高抗HR；＞15，≤45为抗R；＞45，≤75为感S；＞75，≤100为高感HS；叶片病级分级标准：0)无症状；1～2)零星感染；3～4)少量小斑点；5～6)20～50％的叶片有小斑点；7～8)植株萎蔫并且斑点超过50％；9)植株死亡，Wehner T C & Shetty N V，2000。