[发明专利]一种重组鸡干扰素γ标准品的制备方法在审
| 申请号： | 201610755965.0 | 申请日： | 2016-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN106244653A | 公开（公告）日： | 2016-12-21 |
| 发明（设计）人： | 赵俊;王明丽;汪良青;赵雨;李树启;符修乐;戚仕梅;高耀辉;赖鹏飞;马腾飞;王利利;周炜 | 申请（专利权）人： | 芜湖英特菲尔生物制品产业研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/16;C07K14/57;C12Q1/70;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 241000 安徽省芜湖市经济技术开*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组鸡干扰素γ标准品的制备方法，包括：(1)将重组鸡干扰素γ的重组菌进行发酵和诱导，直接收集菌体破碎后的上清提取总蛋白；(2)总蛋白经亲和层析纯化、阴离子交换层析纯化和分子筛层析纯化；(3)向重组鸡干扰素γ纯化后蛋白溶液中加入冻干保护剂，经真空冷冻干燥，即可制得重组鸡干扰素γ标准品。按照此方法制备的重组鸡干扰素γ抗病毒活性标准品工作效价为：2.4×1010U/mL；SDS‑PAGE检测其纯度为97.34％；HPLC检测其纯度为99.79％。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 干扰素 标准 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组鸡干扰素γ标准品的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：(1)将重组鸡干扰素γ的重组菌进行发酵和诱导，直接收集菌体破碎后的上清提取总蛋白，所述重组鸡干扰素γ的重组菌为BL21/pET‑32a‑rChIFNγ工程菌，其DNA序列如Seq ID NO.1所示，原核表达载体pET‑32α，以大肠埃希菌BL21作为原核表达的宿主；(2)总蛋白经亲和层析纯化、阴离子交换层析纯化和分子筛层析纯化，即可得重组鸡干扰素γ纯化后蛋白溶液；(3)向重组鸡干扰素γ纯化后蛋白溶液中加入冻干保护剂，经真空冷冻干燥，即可制得重组鸡干扰素γ标准品。
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