[发明专利]牛大力的高效液相指纹图谱的建立方法

摘要

本发明公开了一种牛大力的高效液相指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：步骤一、牛大力供试品溶液的制备；步骤二、牛大力指纹图谱的测定：将牛大力供试品溶液注入高效液相色谱分析仪，记录110min内的色谱图，色谱分析条件为：柱温为30℃，检测波长为200‑320nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，流动相为乙腈‑体积浓度为0.05％的磷酸水溶液，梯度洗脱流速为0.6ml/min。本发明提供一种牛大力的高效液相指纹图谱的建立方法，建立牛大力的标准指纹图谱，为牛大力药材的真伪和品质的甄别和质量控制提供科学依据。 1

主权项

1.一种牛大力的高效液相指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、牛大力供试品溶液的制备：取牛大力药材100g，用粉碎机将其粉碎，置于圆底烧瓶中，加入体积分数为50％的甲醇1000ml，浸泡2.0h，90℃水浴回流提取120min，放冷至室温，过滤，所得滤液减压干燥后得牛大力干膏；精密称取牛大力干膏2g，用25ml蒸馏水溶解，过滤，所得滤液上柱，经D101大孔树脂填充的色谱柱吸附30min，用蒸馏水水洗脱至无色，弃去水液，再用10倍色谱柱柱体积的体积分数为30％的甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后加体积分数为30％的甲醇制备成为0.1g/ml的溶液，过滤；步骤二、牛大力指纹图谱的测定：将牛大力供试品溶液注入高效液相色谱分析仪，进样体积为5‑20μl，记录110min内的色谱图，得到牛大力的指纹图谱，色谱分析条件为：柱温为30℃，检测波长为200‑320nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，流动相为乙腈‑体积浓度为0.05％的磷酸水溶液，梯度洗脱流速为0.6ml/min，梯度洗脱程序为：0～5min，乙腈体积浓度由5％匀速增加至8％；5～15min，乙腈体积浓度由8％匀速增加至20％；15～45min，乙腈体积浓度由20％匀速增加至25％；45～55min，乙腈体积浓度由25％匀速增加至55％；55～65min，乙腈体积浓度由55％匀速增加至70％；65～100min，乙腈体积浓度由70％匀速增加至90％；100～110min，乙腈体积浓度由90％匀速增加至95％。