[发明专利]一种茶条槭组织培养快速繁殖的方法

摘要

本发明提供一种茶条槭组织培养快速繁殖的方法，其特征是在优选木本在基础上，分别采用茶条槭5年生无病虫害、健壮植株的当年生萌条和成熟胚进行组培快繁的方法，属林木组培繁育技术领域。主要技术要点是以筛选的茶条槭优良植株为母本，选取当年生带芽茎段和成熟胚为外植体，诱导萌发，然后用无菌苗诱导产生不定芽，再由不定芽诱导再生植株生根进行炼苗驯化、移栽上盆的繁殖方法。采用本发明提供的茶条槭快繁技术进行批量生产，方法简便，再生周期短，繁殖系数高，移栽成活率高，出苗整齐一致，便于养护管理，节约人力及土地资源，生产成本低，不受季节限制持续获得再生植株，可用于苗木产业化生产。

主权项

一种茶条槭组织培养快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：外植体的选择：对茶条槭进行为期两年的物候期观察，详细记载每株苗木的萌芽期、花期、果期、翅果颜色、红叶期、落叶期、病虫害情况，筛选出无病虫害、健壮的茶条槭植株；茎段诱导萌发：取经过筛选的植株无病虫害萌条，截取当年生萌条的第一个至第四个带芽幼嫩茎段为实验材料，除去叶片，切段进行常规消毒，消毒茎段切成1.5‑2.0cm长，每段带一对腋芽，再接种到启动培养基中，培养12‑14天，使每个腋芽诱导1‑2个芽，叶色嫩绿，生长健壮的无菌苗；所述的启动培养基为MS+6‑BA0.5‑1.0mg/L+NAA0.05‑0.1mg/L+AC0.5‑1.0g/L+PVP100‑200mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L，其培养环境条件为温度23±2℃、湿度60±2%、光照12‑14h/d、光强1500‑1800lx的恒温恒湿培养室内；胚培养诱导萌发：取经过筛选的优良性状茶条槭为母本，采用形态成熟种子，去掉果翅，用洗衣粉浸洗15分钟，流水冲洗2小时，再在超菌工作台进行消毒，将消毒好的种子，去除外种皮，接种到胚培养的培养基中，培养2周，胚根及子叶逐步产生，进而形成完整无菌苗，初次接种三天后，进行第一次转接，其后20天转接一次，培养基不变，该方法有效控制褐化，同时可通过转管的方式，吸附种胚中抑制其萌发的抑制物质，促进胚萌发，所述的胚培养的培养基为MS+GA31.0‑3.0mg/L+AC0.5‑1.0g/L+PVP100‑200mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L，其培养环境条件为温度23±2℃、湿度60±2%、光照12‑14h/d、光强1500‑1800lx的恒温恒湿培养室内；增殖培养：将茎段诱导萌发或胚培养诱导萌发诱导而来的无菌苗接种到增殖培养基上培养，培养12‑16天，得到从基部和腋芽处分化出新的芽苗，所述的增殖培养基为MS+6‑BA0.05‑0.1mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L+TDZ0.5‑1.0mg/L+ AC 0.5‑1.0g/L +PVP100‑200mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L，其培养环境条件为温度23±2℃、湿度60±2%、光照12‑14h/d、光强1500‑1800lx的恒温恒湿培养室内；壮苗生根培养：待新芽长到2‑3cm时，将生长健壮的单芽切下，接种到生根培养基中培养，培养25‑30d后，有不定根产生，形成完整的健壮植株，所述的生根培养基为MS+IBA0.5‑1.0mg/L+AC0.5‑1.0g/L+PVP100‑200mg/L+蔗糖20g/L+琼脂粉4.5g/L，其培养环境条件为温度23±2℃、湿度60±2%、光照12‑14h/d、光强1500‑1800lx的恒温恒湿培养室内；炼苗移栽：将株高在4cm以上的生根瓶苗移到培养室外，在自然散射光条件下炼苗3～7d，在移栽前打开瓶盖驯化5～7d，取出无菌苗，清洗植株根部附着的培养基，进行移栽上盆，移栽基质为腐叶土：泥炭土：珍珠岩1：1：1，移栽后用多菌灵1000倍液将基质浇透水，放于PVC温室大棚进行养护管理；维护管理：移栽后将其置于散射光丰富处，移栽后1～3周，每天喷水1～2次，空气相对湿度保持在60%以上，移栽一个月后，植株开始长出新叶，此时每隔两周薄施腐熟饼肥一次，病虫害防治一次，移栽两个月后，幼苗生长良好，在营养钵中生长至高15～20cm时，移至大田苗圃进行定植。