[发明专利]基于响应面法优化当归多糖提取工艺参数的方法

摘要

开了一种基于响应面法优化当归多糖提取工艺参数的方法，用于甘肃产的“岷归3号”当归多糖的提取工艺，它包括药材除杂，水提醇沉法提取当归多糖，计算出当归药材中多糖的提取率等步骤，本发明采用响应面法确定当归多糖提取的变量参数，选取对当归多糖得率又较显著影响的三个因素，在单因素实验基础上，设计三因素五水平的响应面分析实验，进而确定出当归多糖的最佳提取工艺条件为提取时间120min，所加入水的体积与当归药材的质量的液料比7∶1ml/g，滤液中乙醇的质量浓度65%，在此条件下按照上述方法所述的步骤提取多糖，测定多糖含量计算得率为8.54645%。与理论预测值相差0.12379%，充分说明响应面分析法对当归多糖提取条件进行的优化可靠，有实用性。

主权项

一种基于响应面法优化当归多糖提取工艺参数的方法，本方法所述当归为利用重离子辐照生物育种技术选育出的当归新品种“岷归3号”，为当归Angelica sinensis (Oliv.)Diels的干燥根，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一、药材除杂，称取适量当归药材粉碎，用粒度为50目的筛子筛选后称取10.0g药材粉末放置于容量为250mL的圆底烧瓶中，加入80mL石油醚于75℃水浴中加热回流1h，抽滤，弃去滤液，将滤渣收集到容积为250mL的圆底烧瓶中，加入质量浓度为85%的乙醇溶液60ml，回流2h，抽滤，弃滤液，收集滤渣，当归药材中脂溶性杂质被除去；步骤二、水提醇沉法提取当归多糖，采用响应面法确定当归多糖提取的变量参数，设置三因素五水平的试验方式进行重复试验获得实验结果，计算出当归多糖得率，再采用Design Expert 7.0.0软件进行多元回归分析，得出试验因素对响应值影响的回归方程为：式中响应值Y为当归多糖的提取率，变量参数X1为醇沉法提取时间、变量参数X2为所加入水的体积与当归药材质量的液料比、变量参数X3为加入乙醇后滤液中乙醇的质量浓度，最终确定X1为2h，X2为7ml/g，X3为66%；按照所述的变量参数，在步骤一所制备的滤渣中加入200ml蒸馏水于80℃水浴中加热回流提取2次，每次提取时间为1h，得到滤液，在滤液中加入质量浓度为80%的乙醇，测量滤液中乙醇的质量浓度达到66%后沉淀12‑24小时后，滤除上清液，将滤渣进行离心分离后，在滤渣中加入水进行溶解，所加入水的体积与当归药材的质量比为7ml/g，在溶液中再加入氯仿与正丁醇的混合液除去溶液中的蛋白，得到当归粗多糖；步骤三、将步骤二所制得的当归粗多糖用蒸馏水定容至100mL容量瓶中制得粗多糖溶液，再取1.6mL粗多糖溶液定容到100mL容量瓶中，用作标准曲线的方法测吸光度，计算出当归药材中多糖的提取率。