[发明专利]乳酶生制备方法及应用

摘要

本发明涉及含活性活肠链球菌组分的口服制剂，具体涉及乳酶生制备方法及应用。该制备方法由菌种纯化、配置培养基、灭菌、接种、发酵、菌体分离等步骤组成，通过本发明所述制备方法工艺简单易操作，活菌数高，生命力强，每克菌粉含乳酸菌2亿个左右，通过对其生命力研究发现，在2年的有效期内，该菌死亡数量在5％以内。用本发明制备方法制备的产品，质量稳定，安全可靠，对治疗小儿及成人胃肠疾病如消化不良、腹胀、腹泻等有显著疗效。

主权项

乳酶生制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)菌种纯化取活肠球菌冻干菌种，放入液体培养基在37℃条件下24小时后接入平板培养基中于37℃恒温培养48小时，接入脱脂鲜奶牛奶试管培养37℃恒温12小时后，将牛奶试管置紫外灯下照射15分钟后接入平板培养基中于37℃恒温培养48小时后，分接于试管中，备用；(2)配置三级培养基：配置一、二、三级培养基；(3)培养基灭菌：一、二、三级培养基灭菌时间均为121℃灭菌30分钟；(4)接种：一级种子接种操作过程：取生产用斜面菌种，以无菌操作法，用接种环取菌苔接入一级种子培养液中，接种量约为6％，将接种好的一级种子培养液放入培养箱内培养；二级种子接种操作过程：取培养好的一级种子培养液，按无菌操作法，将一级种子培养液迅速倒入二级培养基中，接种量约为17ml，将接种好的二级种子液放入电热恒温培养箱内培养；三级种子接种操作过程：取培养好的二级种子液，按无菌操作法，将二级种子液迅速倒入三级培养基中，接种量约为354.5ml，将接种好的三级种子液放入电热恒温培养箱内发酵；(5)发酵：将三级种子进行发酵培养；(6)菌体分离：将布氏漏斗内，铺好已灭菌600目滤布，再将滤布上铺上滤纸，用无菌水润湿，再将400克灭菌后的碳酸钙用400ml已灭菌纯化水溶解后倒入漏斗内，真空抽滤，待碳酸钙干燥后缓缓倒入发酵液，真空度为‑0.03—‑0.05Mpa，待发酵液完全抽滤完毕后，继续抽滤见滤饼出现裂隙时停止。