[发明专利]联产异戊二烯和1;3-丙二醇的基因工程菌及构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种联产异戊二烯和1,3‑丙二醇的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明在基因工程菌株中整合了甘油脱水酶基因、甘油脱水酶再激活酶基因、敲除了甘油激酶基因，并过表达了HMG‑CoA还原酶、HMG‑CoA合成酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶、焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶、IPP异构酶、异戊二烯合成酶、醛还原酶和转氢酶。本发明利用基因工程手段在大肠杆菌体内成功构建了联产异戊二烯和1,3‑丙二醇的代谢途径，利用该方法使基因工程菌株细胞内的氧化还原辅因子代谢平衡，并提高了利用葡萄糖和甘油发酵联产异戊二烯和1,3‑丙二醇的产率。

主权项

1.一种联产异戊二烯和1,3‑丙二醇的基因工程菌，其特征在于：其基因组在宿主菌基因组上整合甘油脱水酶基因和甘油脱水酶再激活酶基因、敲除了甘油激酶基因，并过表达了乙酰辅酶A酰基转移酶/HMG‑CoA还原酶基因、HMG‑CoA合成酶基因、甲羟戊酸激酶基因、磷酸甲羟戊酸激酶基因、焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶基因、异戊烯焦磷酸异构酶基因、异戊二烯合成酶基因、醛还原酶基因和转氢酶基因；所述宿主菌为大肠杆菌；所述甘油脱水酶基因和甘油脱水酶再激活酶基因来源于肺炎克雷伯菌Klebsiellapneumoniae；乙酰辅酶A酰基转移酶/HMG‑CoA还原酶基因来源于粪肠球菌Enterococcusfaecalis；HMG‑CoA合成酶基因来源于粪肠球菌Enterococcusfaecalis；甲羟戊酸激酶基因、磷酸甲羟戊酸激酶基因、焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶基因、异戊烯焦磷酸异构酶基因均来源于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae；异戊二烯合成酶基因来源于银白杨Populus alba；转氢酶基因来源于大肠杆菌Escherichia coli；醛还原酶基因来源于大肠杆菌Escherichia coli；甘油激酶基因来源于大肠杆菌Escherichia coli。