[发明专利]纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法有效
| 申请号： | 201610772576.9 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN106442479B | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 周小明;邢达;刘宏星 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76;G01N27/30;G01N27/327 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 崔红丽;裘晖 |
| 地址： | 510631 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法。该方法为：将致病细菌的靶毒力基因的DNA分子片段与含有“光开关”分子和TPrA的PBS溶液进行混合，得到混合液；然后将混合液滴到pBPE上；将pBPE正面朝向PMT，然后将该pBPE放置到暗盒里；最后，将pBPE的一对驱动电极连接到直流电源上，施加驱动电压；在pBPE的阳极获得一个ECL信号，将在10s内观察到的最大的可再现的发光信号作为有效的信号值，即实现快速灵敏基因检测致病菌的目的。该方法利用分子开关的性质，可达到非标记检测的目的；灵敏度高；成本低；检测装置的构建更简便。 | ||
| 搜索关键词： | 纸基双 极性 电极 电化学 发光 分子 开关 系统 用于 快速 灵敏 基因 检测 致病菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法，其特征在于包括如下步骤：将致病细菌的靶毒力基因的DNA分子片段与含有“光开关”分子和TPrA的PBS溶液进行混合，得到混合液；然后将混合液滴到pBPE上；将pBPE正面朝向PMT，然后将该pBPE放置到暗盒里；最后，将pBPE的一对驱动电极连接到直流电源上，施加驱动电压；在pBPE的阳极获得一个ECL信号，将在10s内观察到的最大的可再现的发光信号作为有效的信号值，即实现快速灵敏基因检测致病菌的目的；所述的致病细菌为单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)；所述的单增李斯特菌的靶毒力基因hlyA特异性的引物如下：上游引物：5'‑AGGAATGACTAATCAAGACAAT‑3'；下游引物：5'‑GGAAGGTCTTGTAGGTTCAT‑3'；所述的“光开关”分子为[Ru(phen)2dppz]2+；所述的“光开关”分子的浓度为30μM～0.1mM；所述的驱动电压设定为850V。
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