[发明专利]一种建库方法及SNP分型方法在审
| 申请号： | 201610772852.1 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN108300773A | 公开（公告）日： | 2018-07-20 |
| 发明（设计）人： | 盛司潼;黄思强 | 申请（专利权）人： | 广州康昕瑞基因健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510000 广东省广州市萝*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种建库方法，包括：PCR扩增待测序样本，得到扩增产物；在扩增产物上连接接头一，得到含有IIS型限制性内切酶识别序列以及IIS型限制性内切酶切割位点的连接产物，接头一为双链核酸分子，IIS型限制性内切酶切割位点与待测SNP位点之间的距离为0至5个碱基；采用IIS型限制性内切酶对连接产物进行酶切，得到含有待测SNP位点和接头一的第一核酸片段，第一核酸片段上经酶切形成第一末端；在第一核酸片段的第一末端处连接接头二，得到文库分子，接头二为含有测序引物结合位点的双链核酸分子。本发明还提供了一种SNP分型方法及检测SNP位点突变的试剂盒。本发明缩短了位点检测时间，提高了检测准确性，且统一了同一体系中进行多个位点检测的测序引物。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸片段 双链核酸分子 测序引物 扩增产物 连接产物 连接接头 切割位点 建库 酶切 结合位点 同一体系 位点检测 文库分子 点检测 末端处 试剂盒 个位 检测 测序 碱基 上经 突变 样本 统一 | ||
【主权项】：
1.一种建库方法，其特征在于，包括以下步骤：A、PCR扩增含待测SNP位点的待测序样本，得到扩增产物；B、在所述扩增产物上连接接头一，得到含有IIS型限制性内切酶识别序列以及IIS型限制性内切酶切割位点的连接产物，所述接头一为双链核酸分子，所述IIS型限制性内切酶切割位点与所述待测SNP位点之间的距离为0至5个碱基；C、采用IIS型限制性内切酶对连接产物进行酶切，得到含有待测SNP位点和接头一的第一核酸片段，且所述第一核酸片段上经酶切形成第一末端；D、在第一核酸片段的第一末端处连接接头二，得到文库分子，所述接头二为含有测序引物结合位点的双链核酸分子。
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