[发明专利]一种建库方法及SNP分型方法有效
| 申请号： | 201610773096.4 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN108300764B | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 盛司潼;黄思强 | 申请（专利权）人： | 武汉康昕瑞基因健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京远智汇知识产权代理有限公司 11659 | 代理人： | 张海英 |
| 地址： | 430040 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种建库方法，包括：A、利用特异性扩增引物组对含待测SNP位点的待测序样本进行PCR扩增，得到扩增产物；所述引物组中的至少一种引物上含有IIS型限制性内切酶识别序列，所述扩增产物上含有IIS型限制性内切酶切割位点，所述IIS型限制性内切酶切割位点与所述待测SNP位点之间的距离为0至5个碱基；B、采用IIS型限制性内切酶对扩增产物进行酶切，得到含有待测SNP位点的第一核酸片段，且所述第一核酸片段上经酶切形成第一末端；C、在连接酶作用下，所述第一核酸片段在第一末端处连接测序接头，得到文库分子。本发明还提供了一种SNP分型方法。本发明缩短了位点检测时间，提高了检测的准确性，且统一了同一体系中进行多个位点检测的测序引物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 方法 snp | ||
【主权项】：
1.一种建库方法，其特征在于，包括以下步骤：A、利用特异性扩增引物组对含待测SNP位点的待测序样本进行PCR扩增，得到扩增产物；所述特异性扩增引物组中的至少一种扩增引物上含有IIS型限制性内切酶识别序列，所述扩增产物上含有IIS型限制性内切酶切割位点，所述IIS型限制性内切酶切割位点与所述待测SNP位点之间的距离为0至5个碱基；B、采用IIS型限制性内切酶对扩增产物进行酶切，得到含有待测SNP位点的第一核酸片段，且所述第一核酸片段上经酶切形成第一末端；C、在连接酶作用下，所述第一核酸片段在第一末端处连接测序接头，得到文库分子。
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