[发明专利]基于中型土壤动物多代观测的转基因作物风险评价方法

摘要

本发明提供一种基于中型土壤动物多代观测的转基因作物风险评价方法，所述方法是在添加有转基因作物凋落物的培养基中饲养中型土壤动物，通过多代连续观测，统计土壤动物不同代际间的存活率、繁殖率、体长，并对土壤动物功能酶进行检测，综合评价转基因作物对连续多代土壤动物种群适合度的影响。本发明通过对土壤动物培养基配方进行改良，使之更适应转基因作物对土壤动物的多代连续培养；同时，通过监测土壤动物自身功能酶中乙酰胆碱酯酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶等对转基因作物凋落物响应，结合土壤动物死亡率和繁殖率等参数，综合反映土壤动物对转基因作物的响应。

主权项

1.基于白符跳多代观测的转基因作物风险评价方法，其特征在于，在添加有转基因作物凋落物的培养基中饲养白符跳，通过多代连续观测，统计白符跳不同代际间的存活率、繁殖率、体长，并对白符跳功能酶进行检测，综合评价转基因作物对连续多代白符跳种群适合度的影响；所述培养基是由经灭菌处理的石膏粉和活性炭按体积比9:5混合，所得混合粉与无菌水按等体积混合制得；在作物成熟后期，取转基因作物凋落物，去除叶柄后，破碎，得到凋落物粉末，经紫外线照射灭菌后，按4g/m²添加到培养基中；按2000头/m²向添加有转基因作物凋落物的培养基中接入单一类群、同日龄的所述白符跳，以啤酒酵母作为食物，采用黑暗培养，培养温度为20±1℃，相对湿度为90％‑100％，每周至少用无菌水调节培养基一次，保持培养基湿润；每两天更换一次食物，同时将培养基中残余的凋落物粉末清理干净，重新加入凋落物粉末，并加入适量无菌水；在培养的第10天、20天、30天、40天、50天、60天、70天、80天和90天分别采样，统计所述白符跳的活体成虫数量、幼虫数量、卵粒数量，计算存活率、单一世代和多世代繁殖率，培养60天后，随机取样，测量成虫及幼虫的体长，评估转基因作物对连续多代白符跳种群适合度的影响；在培养的第85‑95天，对白符跳功能酶进行检测；所述功能酶包括乙酰胆碱酯酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶中的至少一种；所述转基因作物为转基因玉米。