[发明专利]野生白芨组织培养快速繁殖方法

摘要

一种野生白芨组织培养快速繁殖方法涉及一种植物的培育繁殖方法，特别涉及药物的培育繁殖方法，本发明所述的野生白芨组织培养快速繁殖方法，采用紫花白芨的假鳞茎进行组织培育，经培养基培养后，其分化度率得到了较大的提高，可达到500％‑900％，以适应快速扩大种源，经过缓苗、炼苗后移栽成活率达98％。本发明所述的培育方法简单、适用，成本低，不仅提高了组织培育的分化率，而且培育出的苗较为壮硕，移栽成活率高，一个月基本分化结束，经过诱根、缓苗、练苗，基本在65‑80天即可完成育苗，大大缩短了白芨的培育繁殖时间，为野生白芨的训养提供了规模化种植的可能。

主权项

一种野生白芨组织培养快速繁殖方法，其特征在于，其操作步骤为：a.外植体材料及处理，取紫花白芨的假鳞茎，用小刀、牙刷处理表面杂物和泥土，置于饱和洗衣粉水溶液中浸泡10分钟，并充分摇晃后放于自来水下冲洗1‑2小时，置于超净化工作台待处理；b.将步骤a处理的假磷茎置于超净化工作台中用无菌水冲洗1次，75％乙醇消毒30s左右，无菌水冲洗1次；采用0.1‑0.2％升汞消毒灭菌5‑10分钟，无菌水冲洗3‑4次，再将消毒处理后的假鳞茎切开，大小为0.5平方厘米，每块均带有芽眼，即得芽块；c.将步骤b切好的芽块置于瓶装的诱导愈伤培养基中，每瓶培养基接种3‑4块同，经过20‑30天即可长出愈伤组织；d.无菌苗分化，步骤c诱导的愈伤组织置于公化培养基中进行分化，用1/2MS+6‑BA2.0‑4.0+NAA0.1‑0.2+蔗糖20％+琼脂8％+PVP0.5％+PH 5.8，原球茎分化出茎叶分化苗，28‑30天的分化率达500—900％。e.步骤d分化培养后，采用有机物促进茎叶分化，所采用的培养基是以MS为基本培养基，并加入1.0的6‑BA和0.1的NAA以及7.5％的香蕉汁，既可以促进白芨球茎的生长，又可以促进白芨的生根，在光照条件下培养35‑45天，苗高度约1.5‑2.0cm并有叶片展开的白芨试管苗；f.生根诱导培养，将步骤e的白芨试管苗转接到筛选出的生根诱导培养基中，每培养瓶接5‑7株小苗，进行壮苗及诱根生长的培养，至平均根数达到3‑6条；g.缓苗：取生长健壮、根系3‑5条、苗高10—15厘米的组培苗从培养室内移出到普通室内,避阳光直射，存放7‑10天，然后再将瓶盖打开，在室内存放10—20天后将幼苗移出培养瓶；h.炼苗：将幼苗根部的琼脂等培养苗全部洗去，将幼苗稍晾干(根系为白色)，放于0.1％的高锰酸钾溶液中消毒8‑12分钟，炼苗过程中选择基质为蛭石：泥炭：珍珠岩＝1：2：1进行移栽，移栽苗存活率可以达到90％；i.从白芨根段中分离到白芨真菌，初步鉴定为丝核菌属真菌，鉴定为白芨共生菌，通过拌菌移栽实验中，在蛭石：泥炭：珍珠岩＝1：2：1基质上，移栽存活率可达98％；j.栽培技术：采用大棚和遮阳网相结合，紫花三叉白芨每亩栽培6000—12000株/亩，每亩需要400瓶以上的快繁白芨苗(每瓶有苗15株左右)，栽种2年，产量近2吨；k.白芨苗的田间管理，白芨在田间管理除草要求严格，组培苗栽植后应适当用遮阳，避免阳光直射，同时注意浇水保湿，去除杂草，除草时浅锄，避免伤根；白芨喜阴，保持湿润，干旱时要浇水，7～9月份早晚各浇一次水；白芨又怕涝，大雨及时排水避免伤根；白芨是喜肥的植物，每个月喷施一次磷酸二氢钾或稀薄的人畜粪尿，10月以后，逐渐停止生长，进入休眠，但是要防止杂草丛生。