[发明专利]一种固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法，具体步骤如下：制备MRS培养基备用；将罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基上，37℃培养30‑36h，如此连续活化3‑5次后，再接种于MRS培养基中，37℃培养24h得到菌种罗伊氏乳杆菌种子液；将豆粕、豆粉、玉米粉、麸皮、甜菜碱、甘露糖混合均匀得到固态培养基；将种子液按照接种到固态培养基中，于37℃，固态发酵24‑28小时；烘干、装袋，密封保存。产物中罗伊氏乳杆菌活菌数达到3.2±0.5×10⁹活菌单位每克(CFU/g)，该产物作为猪饲料添加剂，具有降低母猪流产发生率，减少人工授精的频率和成本；降低哺乳仔猪腹泻发生率和死亡率等功效。

主权项

1.一种固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)菌种的选择选择罗伊氏乳杆菌在4℃条件下保存备用，所述的罗伊氏乳杆菌的保藏编号为CCTCC M 2015660；(2)MRS培养基的制备将蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、葡萄糖、吐温80、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、蒸馏水，加热溶解，调节pH值为6.7，分装后，121℃高压蒸汽灭菌20min，备用；(3)菌种的活化与种子液的获得将保存在4℃的罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基上，37℃培养30‑36h，如此连续活化3‑5次后，再接种于MRS培养基中，37℃培养24h，得到菌种罗伊氏乳杆菌种子液；(4)固态培养基的制备将豆粕、豆粉、玉米粉、麸皮、甜菜碱、甘露糖混合均匀得到固态培养基；其中，固态培养基中各原料的重量百分比如下：豆粕：豆粉：玉米粉：麸皮：甜菜碱：甘露糖＝12‑18:12‑18:7‑11:7.5‑11.5:0.8‑1.2:0.4‑0.6；(5)发酵将菌种罗伊氏乳杆菌种子液按照5％的接种量接种到固态培养基中，并加入自来水，使得水分含量达50％，搅拌均匀后，放于37℃恒温箱中，固态发酵24‑28小时；(6)烘干：将固态发酵后的罗伊氏乳杆菌微生态制剂，放入恒温干燥箱中，干燥温度为37‑45℃，摊开，使厚度不超过6厘米，烘至水份含量达到16‑20％，即可装袋，密封保存。