[发明专利]一种葡萄籽原花青素低聚体高效提取分离方法

摘要

本发明属于葡萄籽综合利用的技术领域，具体涉及一种葡萄籽原花青素低聚体高效提取分离方法。该种葡萄籽原花青素低聚体高效提取分离方法，包括以下步骤：（1）低温干燥粉碎；（2）脱脂；（3）酶处理；（4）原花青素提取；（5）低温浓缩；（6）原花青素高聚体降解；（7）纯化；（8）低温浓缩、干燥。该提取分离方法明显提高了葡萄籽原花青素的得率以及提取液中低聚体原花青素的含量，同时低温提取分离很好保留了原花青素的生物活性，通过柱层析分级纯化得到高纯度原花青素低聚体。

主权项

一种葡萄籽原花青素低聚体高效提取分离方法，包括以下步骤：（1）低温干燥粉碎：首先将葡萄籽进行低温干燥；然后粉碎得到40‑60目葡萄籽粉；（2）脱脂：对所得葡萄籽粉通过超临界二氧化碳萃取葡萄籽油进行低温去除油脂，得到脱脂葡萄籽粉；（3）酶处理：采用纤维素酶、β‑葡萄糖苷酶对所得脱脂葡萄籽粉进行生物酶处理：取脱脂葡萄籽粉以固液比1:20加入蒸馏水；以脱脂葡萄籽粉为底物，分别加入20U/mL纤维素酶和10U/mLβ‑葡萄糖苷酶，酶解条件为：pH值4.4、酶解温度47.8℃、酶解时间为2h；（4）原花青素提取：采用体积分数为70%的乙醇对经过生物酶处理的脱脂葡萄籽粉进行提取得到原花青素提取液；提取液中原花青素平均聚合度为3～10，低聚体含量为40～60%；（5）低温浓缩：在40℃、真空度0.08Mpa的条件下对所得原花青素提取液进行浓缩，离心取上清液获得原花青素水溶液；（6）原花青素高聚体降解：采用复合酸对所得原花青素水溶液进行降解，得到原花青素低聚体混合物溶液，其中复合酸由草酸、冰乙酸和亚硫酸复配而成；（7）纯化：首先对降解后所得的原花青素低聚体混合物溶液进行大孔树脂吸附、水洗除杂；然后采用乙醇进行梯度洗脱，依次分别得到不同聚合度的低聚体原花青素乙醇溶液；（8）低温浓缩、干燥：对上述不同聚合度的低聚体原花青素乙醇溶液进行低温浓缩，获得原花青素低聚体水溶液；通过冷冻干燥得到成品。