[发明专利]一种川楝内生放线菌的分离方法在审
| 申请号： | 201610800822.7 | 申请日： | 2016-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN106119178A | 公开（公告）日： | 2016-11-16 |
| 发明（设计）人： | 赵珂;张小平;陈强;廖萍;赵翀;廖德聪;敖晓琳 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12N9/42;C12N9/88;C12N9/26;C12N1/18 |
| 代理公司： | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 曹少华 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种川楝内生放线菌的分离方法，具体提供了一种表面消毒方法和组织培养方法，同时还提供了一种用于组织培养过程的酶解液；本发明分离方法可有效提高川楝内生放线菌的分离数量。此外，本发明还提供了一种培养基，该培养基适用于川楝内生放线菌的培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 川楝内生 放线菌 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种川楝内生放线菌的分离培养方法，包含以下步骤：(1)取川楝组织，体积浓度0.1％的吐温20水溶液清洗60秒‑90秒，无菌水冲洗；体积浓度75％的乙醇水溶液浸泡5分钟‑10分钟，无菌水冲洗；有效氯浓度为1％‑2％的次氯酸钠水溶液浸泡5分钟‑10分钟，无菌水冲洗，体积浓度10％碳酸氢钠水溶液漂洗10分钟；(2)取步骤(1)处理后的川楝组织，放入无菌的搅拌器中打碎后，置于无菌研钵，加灭菌细砂与液氮进行研磨；(3)取步骤(2)得到的研磨液，装入无菌离心管，按体积比1∶2的比例，加入酶解液，混匀，避光处置，离心；所述避光处置任选自：避光放置、避光搅拌和/或避光振荡；(4)取步骤(3)离心获得的上清液，稀释，涂布于培养基上培养；所述培养基，合终浓度为50微克每毫升的制霉菌素和终浓度为50微克每毫升的重铬酸钾。
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