[发明专利]一种检测番茄红素的方法有效
申请号: | 201610802948.8 | 申请日: | 2016-09-06 |
公开(公告)号: | CN106124670B | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 李翔宇;汪志明;陆姝欢;舒敏 | 申请(专利权)人: | 嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/74 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 430070 湖北省武汉市东湖开发*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 一种检测番茄红素的方法,包括以下步骤:(1)确定番茄红素及类胡萝卜素出峰时间;(2)标曲制作;(3)样品前处理;(4)检测;(5)含量计算。本发明具有如下的有益效果:使用蒸发光检测器检测番茄红素及其他类胡萝卜素,结合三通在番茄红素出峰时间(11‑12 min内)将番茄红素峰去掉,既能保证其他组分出峰,又可消除过量番茄红素对蒸发光检测器的污染,从而实现定量检测其他类胡萝卜素。蒸发光检测器为质量检测器,且可检测不发光物质,在使用标品确定样品出峰时间后,可以根据样品出峰面积百分比计算样品中其他类胡萝卜素的绝对含量。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 番茄 方法 | ||
【主权项】:
1.一种检测番茄红素的方法,包括以下步骤:(1)确定番茄红素及类胡萝卜素出峰时间将番茄红素和其他类胡萝卜素标准品配置成混合标准溶液,在指定的液相色谱条件下进样,确认各标品的出峰时间,上述指定的液相色谱条件为:番茄红素:色谱柱为C18柱;流速0.8‑1.1ml/min;柱温为20‑30℃;进样体积20μL;流动相为A:乙腈:水=9:1;流动相B:乙酸乙酯,原料为HPLC色谱纯;线性梯度洗脱:在前15min内,B由0增为100%,随后,B保持100%;蒸发光检测器:雾化器温度:45‑55℃;载气压力:30psi;蒸发器温度:55‑65℃;其他类胡萝卜素:色谱柱为C18柱;流速0.8‑1.1ml/min;柱温为20‑30℃;进样体积200μL;流动相为A:乙腈:水=9:1;流动相B:乙酸乙酯,原料为HPLC色谱纯;线性梯度洗脱:在前15min内,B由0增为100%,随后,B保持100%;在11‑12min内使用三通使该段时间样品不进检测器;蒸发光检测器:雾化器温度:45‑55℃;载气压力:30psi;蒸发器温度:55‑65℃;(2)标曲制作将番茄红素准品用有机溶剂溶解后配制成一系列不同浓度的标准溶液,使用与步骤(1)相同的液相色谱条件,以相对峰面积Y对浓度X进行回归,计算得回归方程;(3)样品前处理检测样品为菌体、番茄红素晶体、番茄红素油悬液或番茄红素微胶囊微末;前处理方法为使用乙酸乙酯作为溶剂进行提取,其中菌体样品为研磨提取,番茄红素晶体、番茄红素油悬液或番茄红素微胶囊粉末样品为超声提取;(4)检测使用与步骤(1)相同的液相色谱条件,将步骤(3)中处理后的样品进液相进行检测;(5)含量计算根据得到的番茄红素相对峰面积通过标曲计算其含量,通过面积法计算其他类胡萝卜素的含量。
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