[发明专利]一种灵芝总三萜含量的检测方法在审
申请号: | 201610804989.0 | 申请日: | 2016-08-30 |
公开(公告)号: | CN106226437A | 公开(公告)日: | 2016-12-14 |
发明(设计)人: | 王丽娜;王申开;张绍刚;张伟;刘禄增 | 申请(专利权)人: | 威海百合生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264300 山东省威海市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种灵芝总三萜含量的检测方法,主要步骤为标准溶液的制备、标准曲线的绘制、供试品溶液的制备、总三萜含量的测定等。利用饱和碳酸钾溶液萃取、提取灵芝三萜类化合物的工艺,用高效液相色谱仪进行检测,省去了传统技术中后面的酸化、氯仿萃取等步骤,使得测定时间大大缩短、成本降低、检测效率和精密度更高,可广泛应用于检测样品尤其是保健品中灵芝中总三萜的含量。 | ||
搜索关键词: | 一种 灵芝 总三萜 含量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种灵芝总三萜含量的检测方法,采用高效液相色谱法测定灵芝总三萜的含量,其特征在于:包括以下步骤:(1)标准溶液的制备:吸取0.1mg/ml齐墩果酸储备液,用饱和碳酸钾溶液配成浓度为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml、70μg/ml、100μg/ml的标准溶液,作为对照品溶液备用;(2)标准曲线的绘制:避光条件下,取步骤(1)浓度为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml、70μg/ml、100μg/ml的标准溶液各5μl进行高效液相色谱法测定,绘制标准曲线,记录主峰面积,做浓度与峰面积的标准曲线方程;(3)供试品溶液的制备:称取1.0g灵芝提取物样品,置于洁净的离心管中,加入正丁醇25ml并称重,经涡旋处理1~3min、超声处理20~30min,冷却至室温后再称重,用正丁醇补足损失的质量,得到含有灵芝提取物样品的正丁醇溶液;将含有灵芝提取物样品的正丁醇溶液放入离心机中,以3000r/min离心20~30min,用移液枪准确吸取上清液10ml于分液漏斗中,用30ml饱和碳酸钾溶液分3次进行萃取,收集萃取的碳酸钾层,得到供试品溶液;(4)总三萜含量的测定:将步骤(3)制得的供试品溶液在水浴上蒸至近干,以超纯水定容至5ml,经0.45μm滤头过滤后进行高效液相色谱法测定,记录主峰面积,根据步骤(2)标准溶液的标准曲线方程,按灵芝提取物样品1.0g,最后定容至5ml计算,得出灵芝提取物样品中总三萜的含量。
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