[发明专利]一种制备可实时示踪iPSCs源性神经元的方法有效
| 申请号： | 201610805713.4 | 申请日： | 2016-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN106834233B | 公开（公告）日： | 2019-08-13 |
| 发明（设计）人： | 张京钟;余爽 | 申请（专利权）人： | 余爽 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/65;C12N5/0793 |
| 代理公司： | 苏州知途知识产权代理事务所(普通合伙) 32299 | 代理人： | 马刚强 |
| 地址： | 215100 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种制备可实时示踪iPSCs源性神经元的方法。采用Crispr/Cas9基因编辑技术将报告基因mRFP敲入到TUBB3等位基因中，使TUBB3编码序列与mRFP编码序列通过2A肽链连接，并进而制得含有TUBB3‑2A‑mRFP序列的人iPSCs记为hiPSCs‑TUBB3‑mRFP；最终制得的hiPSCs‑TUBB3‑mRFP高效分化为神经元。本发明所述方法，通过定向诱导分化程序，把hiPSCs‑TUBB3‑mRFP高效分化为神经元，从而为流式细胞仪高通量、特异性分选神经元提供了实验基础，并进一步为筛选神经系统药物、检测化合物/环境毒素的神经遗传毒性提供技术平台。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 实时 ipscs 神经元 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备可实时示踪iPSCs源性神经元的方法，其特征在于，采用Crispr/Cas9基因编辑技术将报告基因mRFP敲入到TUBB3等位基因中，使TUBB3编码序列与mRFP编码序列通过2A肽链连接，获得TUBB3‑2A‑mRFP序列，并进而制得含有TUBB3‑2A‑mRFP序列的人iPSCs记为hiPSCs‑TUBB3‑mRFP；并通过定向诱导分化程序，将制得的hiPSCs‑TUBB3‑mRFP高效分化为神经元，即得。
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