[发明专利]一种新的代谢物轮廓分析全二维液质联用方法及其检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种新的代谢物轮廓分析全二维液质联用方法。采用全二维超高效液相色谱‑四极杆飞行时间质谱(2D‑UPLC Q‑TOFMS)联用技术进行全二维UPLC高温高速分析得到其全二维代谢轮廓谱。本方法重复性好，稳定性高，快速可靠。同时，本发明公开了一种新的检测非转基因大豆、转基因大豆、茶叶和银杏叶的全二维代谢轮廓谱的试剂盒，该试剂盒由缓冲液醋酸铵、甲酸铵或碳酸氢铵、0.1％‑0.5％甲酸或醋酸水和乙腈组成。使用该试剂盒检测多种生物类样品全二维代谢轮廓谱的方法具有检测成本低，重复性好，稳定性高，快速高效的特点。

主权项

1.一种新的代谢物轮廓分析全二维液质联用方法，其特征在于，采用全二维液相色谱‑质谱联用技术，在特定的色谱‑质谱条件下进行多种生物类样品的全二维代谢轮廓分析方法，所述的多种生物类样品包括非转基因大豆、转基因大豆、茶叶和银杏叶，特定的色谱质谱条件包括第一维液相条件、第二维液相条件、质谱条件；所述的第一维液相条件为：色谱柱为Waters ACQUITY UPLCTM BEH Amide亲和色谱柱，流动相A为含10mM甲酸氨的40％乙腈水溶液，B为含10mM甲酸氨的95％乙腈水溶液；梯度洗脱条件为：0～5min为100％B相，5～200min线性变化至0％B相,保持10min，210～210.01min升至100％B相并保持39.99min；流速0.01mL/min，柱温30℃，进样量20μL；所述的第二维液相条件为：色谱柱为Agilent C18反向色谱柱，流动相A为0.1％甲酸水溶液，B为乙腈；其液相分析条件分为三个阶段，第一阶段为0‑75min，梯度洗脱条件为：初始流动相为80％A相，0～1.5min为30％A相，1.5～1.51min升至80％A相并保持0.49min；流速0.7mL/min，柱温60℃；第二阶段为75‑165min，梯度洗脱条件为：初始流动相为95％A相，0～1.5min为60％A相，1.5～1.51min升至95％A相并保持0.49min；流速0.7mL/min，柱温60℃；第三阶段为165‑200min，梯度洗脱条件为：初始流动相为99％A相，0～1.5min为90％A相，1.5～1.51min升至99％A相并保持0.49min；流速0.7mL/min，柱温60℃；柱后流出液经分流后进入质谱检测；所述的质谱条件为：采用电喷雾离子源正离子模式检测；脱溶剂气为高纯氮气，流量气为600L/h；脱溶剂气温度均为300℃；毛细管电压和裂解电压分别为3500V和130V，雾化器压力为25psi；质量扫描范围为80～1200m/z；每0.97秒采集一次数据以获得全二维代谢轮廓谱。