[发明专利]一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法

摘要

本发明公开了一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法；主要包括脱硫杆菌发酵液处理和胞内蛋白提取两部分，涉及离心分离、萃取、纯化、风干等步骤。解决了目前脱硫杆菌蛋白提取的问题，填补了国内脱硫杆菌胞内蛋白专利领域的空白。该方法通过发酵液离心分离、细胞破碎、蛋白提取与纯化实现脱硫杆菌胞内有效蛋白的分离纯化。本发明是一种易于操作、成本低、安全可靠的提取方法。

主权项

一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法，其具体步骤如下：(1)脱硫杆菌活化培养、液体发酵培养，取发酵液，离心，去除上清液，收集下层沉淀；(2)取步骤(1)中下层沉淀，加入1～2mL/g裂解液，在0～4℃条件下磁力搅拌，放入‑18～‑22℃冷冻8～10小时；(3)将步骤(2)中的冷冻物质，在0～4℃条件下超声破碎，后再次放入‑18～‑22℃冷冻8～10小时；(4)将步骤(3)中得到的冷冻物质，在0～4℃条件下超声破碎，离心；(5)取步骤(4)中离心得到的上清蛋白溶液，加入有机混合溶液，充分混匀震荡后离心；(6)将步骤(5)中的离心后混合物，去除上清液，加入有机溶剂，充分混匀震荡，将混液离心；(7)重复操作步骤(6)2～4次，将得到的离心后的混合物，去除上清液，冻干机冷冻干燥，密闭，0～4℃冷藏保存。