[发明专利]禽流感等家禽免疫抑制性病原体多重检测试剂及其应用

摘要

本申请公开了禽流感等家禽免疫抑制性病原体多重检测试剂及其应用。本申请的试剂，包括六条特异性探针，分别为Seq ID No.1至Seq ID No.6所示序列，依序为禽流感病毒、新城疫病毒、马立克氏病毒1型、传染性法氏囊病毒、鸡传染性贫血病毒和J亚型禽白血病病毒的特异性探针。本申请的试剂，包含了禽流感等六种家禽免疫抑制性病原体的特异性探针，能对六种家禽免疫抑制性病原体的靶标序列进行特异性捕获，为六种家禽免疫抑制性病原体的高通量快速检测奠定了基础。本申请的方法，采用本申请的试剂，以液相芯片为基础，为六种家禽免疫抑制性病原体提供了一种快速、准确的检测方法。

主权项

1.一种用于禽流感等家禽免疫抑制性病原体多重检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有六条特异性探针、六组引物对和一组超级引物；六条特异性探针分别为Seq ID No.1所示序列的禽流感病毒特异性探针、Seq ID No.2所示序列的新城疫病毒特异性探针、Seq ID No.3所示序列的马立克氏病毒1型特异性探针、Seq ID No.4所示序列的传染性法氏囊病毒特异性探针、Seq ID No.5所示序列的鸡传染性贫血病毒特异性探针，以及Seq ID No.6所示序列的J亚型禽白血病病毒特异性探针；六条特异性探针中，每条特异性探针的5’端都具有胺基修饰；六组引物对分别为扩增禽流感病毒的第一引物对、扩增新城疫病毒的第二引物对、扩增马立克氏病毒1型的第三引物对、扩增传染性法氏囊病毒的第四引物对、扩增鸡传染性贫血病毒的第五引物对，以及扩增J亚型禽白血病病毒的第六引物对；第一引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.7和Seq ID No.8所示序列，第二引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.9和Seq ID No.10所示序列，第三引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.11和Seq ID No.12所示序列，第四引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.13和Seq ID No.14所示序列，第五引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.15和Seq ID No.16所示序列，第六引物对的上游和下游引物分别为Seq ID No.17和Seq ID No.18所示序列；所述超级引物的上游和下游引物分别为Seq ID No.19和Seq ID No.20所示序列，并且，Seq ID No.20所示序列的下游引物的5’端具有生物素标记；Seq ID No.1：5’‑TCAGGCCCCCTCAAAGCCGA‑3’Seq ID No.2：5’‑TTCTCTAGCAGTGGGACAGCCTGC‑3’Seq ID No.3：5’‑ACCGCCCCAAATTCGCACTTGA‑3’Seq ID No.4：5’‑CAACCGGACCGGCGTCCATTC‑3’Seq ID No.5：5’‑CACCTCAAGCGACTTCGACGAA‑3’Seq ID No.6：5’‑ATTTCCGTTGTCCCAGGGGTGG‑3’Seq ID No.7：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGCAGATGAGTCYTCTAACCGAGGTCG‑3’Seq ID No.8：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTGTGCAAARACAYYTTCMAGTCTCTG‑3’Seq ID No.9：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGCAGTGATGTGCTCGGACCTTC‑3’Seq ID No.10：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTGCCTGAGGAGAGGCATTTGCTA‑3’Seq ID No.11：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGCAGGTGAGCCAATCGGATA‑3’Seq ID No.12：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTGAAGAGAGAAGGAAC TCG‑3’Seq ID No.13：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGCTTCATACGGAGCCTTCTGATT‑3’Seq ID No.14：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTGACAATTAGCCCTGACCCT‑3’Seq ID No.15：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGC GCCGATTTTACGCCTTCA‑3’Seq ID No.16：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTG TACCGCTGTCTCCTCCG‑3’Seq ID No.17：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGCAGAAAGACCCGGAGAAGAC‑3’Seq ID No.18：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTGACACGTTTCCTGGTTGTT‑3’Seq ID No.19：5’‑CAGGCCACGTATTGTCATGC‑3’Seq ID No.20：5’‑TTCTTGGCGTTATGTCGCTG‑3’。