[发明专利]一种高产藻蓝蛋白的红藻培养方法

摘要

本发明涉及一种高效的红藻培养方法，所述方法包括红藻的异养或混养培养和光自养培养，光自养培养是以异养或混养培养所获得的藻细胞作为种子来实施。本发明还涉及一种快速积累藻蓝蛋白的方法。采用本发明的方法可充分发挥红藻在异养或混养阶段藻细胞快速生长的优势，为后续光自养阶段提供大量藻种。红藻在光自养阶段快速生长，并且积累藻蓝蛋白。本申请提供的方法可以解决现有红藻光自养培养过程中细胞生长速率过慢和利用微藻生产藻蓝蛋白时存在的含量及产率低的问题。

主权项

1.一种红藻培养方法，其特征在于，所述方法包括红藻的异养或混养培养，以及光自养培养，其中：所述红藻包括Cyanidioschyzon merolae、Cyanidium caldarium、Galdieriasulphuraria、Galdieria maxima、Galdieria partita和Galdieria daedala；所述培养周期均为1-80天；所述异养或混养培养包括：在生物反应器中加入培养基，接入微藻藻种进行培养，所述接入微藻藻种是按工作体积的0.1～20％接入；/n所述异养或混养培养基基本上由以下成分组成：(NH₄)₂SO₄ 0.1～5克/升、葡萄糖0.1～50克/升、KH₂PO₄ 0.1～2.0克/升、MgSO₄·7H₂O 0.1～2.0克/升、CaCl₂·2H₂O 0.01～1克/升、NaCl 0.01～1克/升、Fe-EDTA 0.01～1克/升、植物生长激素2,4-二氯苯氧乙酸0.001-5毫克/升、苄氨基嘌呤0.001-5毫克/升、脱落酸0.001-5毫克/升、赤霉素0.001-5毫克/升、3-吲哚丁酸0.001-5毫克/升、萘乙酸0.001-5毫克/升、芸苔素0.001-5毫克/升、微量元素2-20ml和水；所述微量元素的组成为H₃BO₃ 0.01-20毫克/升、MnCl₂·4H₂O 0.01-20毫克/升、ZnSO4·7H₂O 0.01-10毫克/升、(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O 0.001-5毫克/升、CuSO₄·5H₂O 0.001-5毫克/升、NaVO₃·4H₂O 0.001-5毫克/升、CoCl₂·6H₂O 0.001-5毫克/升；/n所述异养或混养培养的培养基pH为1.0～4.0；/n所述异养培养时，不需要光照；/n所述混养培养或自养培养的光照强度为1-750μmolm^-2s^-1，光照条件为自然光或人工光，使用连续光照或间歇光照；/n所述异养或混养培养微藻过程中，通过补料将藻液中有机碳源含量控制在0-10g/L的范围内，氮的含量控制在0.5-10mM的范围内，磷的含量控制在0.05-3.5mM的范围内；/n所述光自养培养的培养基由以下组分组成：(NH₄)₂SO₄ 0.1～5克/升、KH₂PO₄ 0.1～2.0克/升、MgSO₄·7H₂O 0.1～2.0克/升、CaCl₂·2H₂O 0.01～1克/升、NaCl 0.01～1克/升、Fe-EDTA 0.01～1克/升、植物生长激素2,4-二氯苯氧乙酸0.001-5毫克/升、苄氨基嘌呤0.001-5毫克/升、脱落酸0.001-5毫克/升、赤霉素0.001-5毫克/升、3-吲哚丁酸0.001-5毫克/升、萘乙酸0.001-5毫克/升、芸苔素0.001-5毫克/升、微量元素2-20ml和水；所述微量元素包含H₃BO₃ 0.01-20毫克/升、MnCl₂·4H₂O 0.01-20毫克/升、ZnSO₄·7H₂O 0.01-10毫克/升、(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O 0.001-5毫克/升、CuSO₄·5H₂O 0.001-5毫克/升、NaVO₃·4H₂O 0.001-5毫克/升、CoCl₂·6H₂O 0.001-5毫克/升；/n光自养培养中培养基的pH为1.0～4.0。/n