[发明专利]一种采用色谱法鉴定福建琯溪蜜柚的方法

摘要

本发明公开了一种采用色谱法鉴定福建琯溪蜜柚的方法，首先采用乙腈对蜜柚外表皮、内表皮、内果皮及果肉等各部位中的化学组分进行提取，然后同时采用气相色谱仪、氢火焰离子检测器和液相色谱‑紫外检测器进行检测，对福建琯溪蜜柚各部位中化学组分进行色谱定性分析，准确地检测出福建琯溪蜜柚中的蛇床子素、柠檬烯、α‑亚油酸、棕榈酸、谷甾醇、油酸酰胺和诺卡酮等特异性物质，成功建立蜜柚特异性物质色谱指纹图谱。本发明方法操作简单、定性准确、检测快速，是一种全新的快捷、准确、简易的蜜柚原产地溯源及品质鉴定方法。

主权项

1.一种采用色谱法鉴定福建琯溪蜜柚的方法，其特征在于，首先采用乙腈对蜜柚外表皮、内表皮、内果皮及果肉中的有机物进行提取，然后同时采用气相色谱仪、氢火焰离子检测器和液相色谱‑紫外检测器进行检测，对福建琯溪蜜柚各部位中有机物进行色谱定性分析，准确地检测出福建琯溪蜜柚中的蛇床子素、柠檬烯、α‑亚油酸、棕榈酸、谷甾醇、油酸酰胺和诺卡酮，成功建立蜜柚特异性物质色谱指纹图谱；1）采用气相色谱仪、氢火焰离子检测器鉴定福建琯溪蜜柚的方法，操作步骤如下：1.1）气相色谱仪的色谱柱初始温度为室温，升温速率10 ℃/min升至温度280 ℃，为满足试样中所有成分的峰完全分离，结合各物质沸点，确定气相色谱最优分析条件如下：气相色谱分析仪分析条件色谱柱：30 m × 0.25 mm DB‑17色谱柱；载气：N2；载气流速：1 mL/min；进样量：1 μL；气化室温度：260 ℃；检测器温度： 280 ℃；检测器为FID检测器；1.2）外标物溶液的配制：根据外标物的质量分数，分别称取不同质量的蛇床子素、α‑亚油酸、棕榈酸和诺卡酮，分别用乙腈加入到10 mL的容量瓶中，用乙腈定容至刻度，配成浓度为1000mg/L外标物溶液，并配成浓度为100mg/L的蛇床子素、α‑亚油酸、棕榈酸和诺卡酮的混合标准外标溶液；1.3）检测样品的制备：准确称取5g鲜样品于100mL离心管中，加入25mL乙腈，涡旋2min，超声30min，4500 r/min 离心3min，抽取上清液1.5mL，经0.22μm微膜过滤，待测样品的蛇床子素、α‑亚油酸、棕榈酸和诺卡酮；2）采用液相色谱‑紫外检测器鉴定福建琯溪蜜柚的方法，操作步骤如下：2.1）液相色谱仪以254 nm 为紫外吸收波长，梯度洗脱，为满足试样中所有成分的峰完全分离，结合各物质极性，确定液相色谱最优分析条件如下：液相色谱分析仪分析条件色谱柱：Zorbax Eclipse XDB C18 250 mm × 4.6 mm × 5 µm 色谱柱；流动相：A为水相，B为乙腈；洗脱流速：1 mL/min；色谱柱温度：30℃；进样量：10μL；梯度洗脱程序：水A%: 乙腈B%为70:30，洗脱0～15min、水A%: 乙腈B%为40:60，洗脱15～20min、水A%: 乙腈B%为40:60，洗脱20～40min、水A%: 乙腈B%为20:80，洗脱40～45min、水A%: 乙腈B%为20:80，洗脱45～65min、水A%: 乙腈B%为70:30，洗脱65～70min；检测器为紫外检测器；2.2）外标物溶液的配制：根据外标物的质量分数，分别称取不同质量的柠檬烯、谷甾醇和油酸酰胺，分别用乙腈溶解加入到10 mL的容量瓶中，用乙腈定容至刻度，配成浓度为1000mg/L外标物溶液，并配成浓度为100mg/L的柠檬烯、谷甾醇和油酸酰胺的混合标准外标溶液；2.3）检测样品的制备：准确称取5g鲜样品于100mL离心管中，加入25mL乙腈，涡旋2min，超声30min，4500 r/min 离心3min，抽取上清液1.5mL，经0.22μm微膜过滤，待测样品的柠檬烯、谷甾醇和油酸酰胺。