[发明专利]一种用于中国地方猪品种大肠杆菌抗性的分子标记方法与应用

摘要

本发明公开了一种用于中国地方猪品种大肠杆菌抗性的分子标记方法与应用。是用miRNA‑215前体序列中的AT插入突变作为中国地方猪品种大肠杆菌抗性的分子标记及其检测方法与应用，检测该分子标记的方法包括待测样品的猪基因组DNA的提取及整个miRNA‑215前体序列的PCR扩增，miRNA‑215前体序列的PCR经SSCP分析，当待测猪个体基因型为BB型(出现4条带中间的第2和第3这2条带，在miR‑215前体序列6bp处存在2个碱基(AT)的插入突变)，则为大肠杆菌抗性强的个体。本发明为中国地方猪品种大肠杆菌性腹泻抗病育种工作的分子标记辅助选择，为提高仔猪腹泻抗病力提供了一种有效的分子标记育种手段。从根本上降低腹泻病的发病率。

主权项

1.一种用于中国地方猪品种大肠杆菌抗性的分子标记方法，其特征在于，包括以下步骤：1）提取待测样本的耳组织DNA；2）以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增，扩增片段包含miRNA‑215前体序列，扩增片段长度203 bp，上下游引物序列为：上游引物为：5’‑ CTGTTCAGTCGCTTTAGAAA ‑3’下游引物为：5’‑ CATCTACCATTGTGTTGCTT ‑3’；3）扩增产物用SSCP方法进行分析，如说明书附图1标号5、8、9所示，出现4条带的为AB型；如说明书附图1标号1、3、4、6、7所示，出现4条带中的第1和第4两条带的为AA型；如说明书附图1标号2所示，出现4条带中的第2和第3两条带的为BB型，选择BB型的样本作为大肠杆菌抗性强的个体。