[发明专利]检测CRP、SAA的免疫层析试剂盒及制备和使用方法

摘要

本发明公开了一种检测CRP、SAA的免疫层析试剂盒及制备和使用方法；所述试剂盒包括免疫层析检测试剂板、纳米胶体金应用溶液和血液采样装置，所述免疫层析检测试剂板包含设有抗CRP包被线、抗SAA包被线和兔抗质控包被线的硝酸纤维素膜；所述纳米胶体金应用溶液包含缀合配对SAA抗体的抗SAA纳米胶体金金贮、缀合配对CRP抗体的抗CRP纳米胶体金金贮、缀合羊抗兔纳米胶体金金贮以及稳定缓冲液。该纳米胶体金免疫层析试剂盒，能够一次取样，一次获取两个指标的结果，简单快速，且精密度在10％以内，与公认方法的相关性良好。

主权项

1.一种同时定量检测CRP、SAA的纳米胶体金免疫层析试剂盒，其特征在于，包括免疫层析检测试剂板、纳米胶体金应用溶液和血液采样装置；所述免疫层析检测试剂板包含设有抗CRP包被线、抗SAA包被线和兔抗质控包被线的硝酸纤维素膜；所述纳米胶体金应用溶液包含缀合配对SAA抗体的抗SAA纳米胶体金金贮、缀合配对CRP抗体的抗CRP纳米胶体金金贮、缀合羊抗兔纳米胶体金金贮以及稳定缓冲液；所述纳米胶体金应用溶液为包含终浓度0.5‑2μg/mL羊抗兔抗体的金贮、终浓度0.5‑2μg/mL抗SAA抗体的金贮、终浓度0.5‑2μg/mL抗CRP抗体的金贮、终浓度1‑3μg/mL的CRP游离抗体，5‑10mg/mLBSA或Casein、1‑10mg/mL表面活性剂的硼酸盐缓冲液；所述表面活性剂为Trition‑100；所述羊抗兔抗体的金贮、抗SAA抗体的金贮、抗CRP抗体的金贮是分别通过如下步骤制备而得的：按1‑10μl/mL的浓度在纳米胶体金中加入K₂CO₃调节pH，加入羊抗兔抗体、抗SAA抗体或抗CRP抗体，混匀，包被浓度为0.005‑0.02mg/mL；加入10mg/mL的Carbowax溶液，使其终浓度为0.2‑0.25mg/mL；离心洗涤后用磷酸盐缓冲液重悬，即得。