[发明专利]一种蛋白质含量的检测方法

摘要

本发明的目的是提供一种利用氨基酸分析检测蛋白质的方法。包括以下具体步骤：(1)称取样品于水解管中，加入乙醇溶液的对酚磺酸水解试剂，超声使样品混合均匀，通氩气或氮气除去溶解氧，封口，放入真空干燥箱中水解；(2)取出试管水解管冷却至室温，开管后，过滤到50ml容量瓶中，洗涤并收集洗涤液，定容至刻度线；(3)吸取0.5‑2ml定容后的样品于试管中，放入真空干燥箱中使其完全干燥；(4)在蒸干后的样品水解物试管中加入样品缓冲液，置振荡混合器上混合均匀，用针管吸取少量，通过过滤器过滤后，用氨基酸分析仪对水解液进行氨基酸分析，将得到样品的氨基酸图谱与标准样品的谱图对照，根据图谱上各峰的保留时间及峰面积求出样品中的氨基酸种类及含量。(5)在求得的氨基酸质量的基础上数减去与氨基酸总摩尔数相同摩尔数的水分子质量，即得到蛋白质的质量，根据样品的称重量及稀释倍数计算样品中蛋白质的含量。

主权项

一种蛋白质水解为氨基酸并通过氨基酸分析检测蛋白质含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的蛋白质的水解：称取样品于蛋白质水解管中，加入酚磺酸水解试剂，酚磺酸水解试剂是以乙醇、甲醇或乙腈的水溶液配制，超声，使样品混合均匀，通氩气或氮气除去溶解氧，封口后，放入真空干燥箱中，于100‑120℃水解14‑20小时；(2)过滤及定容：水解完成后，取出水解管冷却至室温，开管后，将水解物过滤，洗涤水解管和滤纸，收集洗涤液，并定容；(3)蒸干处理：吸取定容后的样品并放入真空干燥箱中，在温度为40‑60℃下使其完全干燥，底部留有少许固体或痕渍。(4)氨基酸的测定：得到的水解氨基酸样品用缓冲溶液稀释，采用氨基酸分析仪进行分析，根据样品峰和标准品峰面积之比，求算水解液中每种氨基酸的含量，并计算得到样品中蛋白质的含量。