[发明专利]一种异种高性能脱细胞真皮基质敷料的制备方法

摘要

本发明提供一种异种高性能脱细胞真皮基质敷料的制备方法，具体包括脱细胞真皮基质的制备及脱细胞真皮基质的改性。其中脱细胞真皮基质的制备包括以下几个步骤：取皮、脱脂、角蛋白酶处理、脱细胞。本发明提供的异种脱细胞真皮基质的制备方法，对于细胞成分脱洗干净，且由于物理法脱去细胞，对胞外基质的结构不产生实质性损坏，同时由于采用角蛋白酶和微波解冻的处理方式，使得基质中胶原纤维空间排列更疏松，提高了材料的孔隙率。同时，采用交联方式产生酰胺化反应，将抗菌吸湿基团引入到敷料中，赋予敷料更多的功效。本发明产品工艺简单，易于实现工业化生产，具有良好的经济社会效益。

主权项

一种异种高性能脱细胞真皮基质敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1. 取皮：选取健康新鲜的哺乳动物皮肤为皮源，对取皮区进行脱毛、消毒，用取皮刀切取带有表皮层和真皮层的断层皮片，裁成所需尺寸，用质量浓度0.1%的苯扎氯铵溶液浸泡20～40min，消毒杀菌；S2. 脱脂：用取皮鼓去除脂肪，切取一定厚度的真皮层浸泡于质量浓度0.1~1%的乳酸中，使其接近先皮状态，取出后低温干燥；S3. 角蛋白酶处理：将S2所得脱脂后的皮片置于角蛋白酶溶液中反应30~60min，其中角蛋白酶溶液与皮片的质量比为2~5，溶液pH保持在9~11之间，角蛋白酶的质量浓度0.1~0.5%，溶液中SDS的质量浓度0.3~0.6%；S4. 脱细胞：将角蛋白酶处理后的皮片放入液氮中浸泡5~10min，取出后自然复温，然后于微波炉中在解冻状态下微波处理3~10min，然后放入质量浓度3%的高渗氯化钠溶液中浸泡10~30min，再经数控超声清洗器以阴阳离子洗脱液浸泡，超声振荡洗涤36~72h，并于每6h更换一次洗脱液，之后再用蒸馏水在超声振荡下清洗12~24h，每4h更换一次蒸馏水，再经低温干燥即制得异种脱细胞真皮基质；S5. 取上述2~10g异种脱细胞真皮基质置于100mL蒸馏水中，溶胀30~60min，然后滴加0.001~0.002mol/L的硝酸铈溶液，充分搅拌，形成均匀混合液；S6. 向上述混合液中加入总质量为0.04~2g、由海藻酸丙二醇酯和多胺化合物形成的混合物，在37℃下振荡反应12~24h，得到经改性的异种脱细胞真皮基质；S7. 取出经改性的异种脱细胞真皮基质，冷冻干燥，然后按要求的规格尺寸进行分切、包装、灭菌，即得成品。