[发明专利]一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法

摘要

本发明公开了一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法，其步骤：(1)将互花米草剪成小段；(2)置于200ml的蒸馏水中浸提；(3)．将互花米草浸出液蒸发浓缩；(4)将50mL的甲醇加入至50mL的浓缩液中，蒸干；(5)再将蒸干后的固体物溶解于50mL甲醇钠溶液；(6)将反应后的甲酯化产物用正庚烷进行萃取；(7)将2g无水硫酸钠加入至上述100mL正庚烷萃取液，蒸发浓缩；(8)将互花米草化感物质浓缩物加入至200mL的中肋骨条藻溶液中混合，得到中肋骨条藻培养液；测定中肋骨条藻培养液中的中肋骨条藻生物量。本发明的互花米草化感物质用量少，使中肋骨条藻生物量最大降低至1.38×105cells/L，该生物量比没有添加互花米草化感物质条件下的中肋骨条藻生物量减少91%，同时还能资源化利用互花米草。

主权项

一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)．将互花米草剪成1～2cm的小段；(2)．称取30～40g互花米草小段置于150～200ml蒸馏水中，在25℃条件下浸提36～48小时，浸提期间每隔6～12小时震荡30min，过滤以去除互花米草残体，过滤后真空抽滤，抽滤得到150ml的互花米草浸出液；(3)．将上述所得的互花米草浸出液用旋转蒸发仪蒸发浓缩，使浓缩后的互花米草浓缩液占浓缩前的互花米草浸出液的30～33% ,得到45～50mL的浓缩液；(4)．将45～50mL的甲醇加入至上述45～50mL的浓缩液中，甲醇与上述浓缩液的重量比为1:1的比例混合后摇匀，静置10～12小时，过滤,再次将过滤后的滤液用旋转蒸发仪蒸干，得到蒸干后的固体物；(5. 再将固体物溶解于50mL的甲醇钠溶液，进行甲酯化反应0.5～1小时，反应结束后，得到甲酯化产物；将上述得到的甲酯化产物对正庚烷进行萃取，得到80～100mL正庚烷的萃取液；将1～2g无水硫酸钠加入至上述80～100mL正庚烷的萃取液，静置10～12小时，得到80～100mL混合萃取液，再对80～100mL的混合萃取液用旋转蒸发仪蒸发浓缩，得到8～10mL的互花米草化感物质浓缩物，其浓度为3.75～4g/mL，该互花米草化感物质为具有抑制藻类生长功能的化感物质；(8)．将上述3.75～4g/L的互花米草化感物质加入至200 mL中肋骨条藻溶液中使互花米草化感物质浓度为5～120 µmmol/L，混合后得到中肋骨条藻培养液；然后将培养液放在摇瓶中培养，培养温度为25℃～27℃，培养96小时，每隔8小时摇动1次，培养结束后，测定试中肋骨条藻培养液中的中肋骨条藻生物量。