[发明专利]一种C末端为酪氨酸的海带小分子ACE抑制肽制备方法

摘要

本发明旨在提供一种以海藻粗蛋白为原料，通过混合蛋白酶生物转化制备以酪氨酸（Tyr）为C末端的小分子ACE抑制肽的方法，该方法简便易行，具有较高的制备效率，且利于扩大生产，为海藻类降血压功能性制品的开发提供一种可行思路。制备具有较高ACE抑制活性的C末端为Tyr的小分子降血压肽，降血压效果显著。所制备的小分子降血压肽为白色粉末，易溶于水，且易吸收、毒副作用小、安全性高，可作为降血压防治药物的一种高效原料。

主权项

一种C末端为酪氨酸的海带小分子ACE抑制肽制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）原料预处理：新鲜海带或海带加工下脚料清洗去除泥沙、杂质，乙醚脱脂、醇提除去甘露醇并醇沉除去多糖大分子，在60℃条件下烘干至恒重，粉碎后过100~200目筛，备用；（2）海带粗蛋白的制备：取步骤（1）制备的海带粉末，用pH值9.0～9.5的缓冲液，按固液体积比1:35～1:50溶解，在45～60℃下匀速搅拌提取5～7 h，碱性条件下溶解海带蛋白，提取结束后，用1 mol/L的盐酸将pH调节到4.3～4.7沉淀海带蛋白，在12000 r/min条件下离心10～15 min，缓慢洗涤沉淀，冷冻干燥后制得海带粗蛋白；（3）多酶体系生物转化：取步骤（2）制得的海带粗蛋白，按照固液体积比1:40～1:60加入pH为7.0～8.0的缓冲液作为提取液，加入3～5wt%的混合酶，将反应体系置于50～65℃，500～800 r/min的水浴摇床中匀速振荡反应5～8 h，反应结束后置于105℃的恒温水浴锅中灭酶15～20 min，在10000 r/min的高速离心机中离心10～15 min，上清液即为海带粗蛋白生物转化液；（4）超滤：将步骤（3）所得到的生物转化液通过1000 Da超滤膜去除大分子，得到含C端为Tyr的ACE抑制小分子肽的海带生物转化液；（5）冷冻干燥：将生物转化液冷冻干燥后制得含C末端为Tyr的小分子ACE抑制肽冻干粉末。