[发明专利]细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法及其应用在审
| 申请号： | 201610864786.0 | 申请日： | 2016-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN106636175A | 公开（公告）日： | 2017-05-10 |
| 发明（设计）人： | 杨晓松;刘超;蔡飞;安琪 | 申请（专利权）人： | 湖北科技学院 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C07K14/47;A61K38/17;A61P25/00;A61P13/12;A61P11/00;A61P21/00;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 437100 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种人源重组rhMG53(TRIM72)蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法及其应用，其是根据人源MG53蛋白的氨基酸序列，依据毕氏酵母密码子偏爱性对其密码子进行优化，得到完全不同的编码人源MG53蛋白的核酸序列，并在该序列的N端加上HIS(6×his)标签，然后构建入毕氏酵母表达载体中，转入毕氏酵母GS115进行诱导表达，表达产物通过亲和层析获得纯化的人源MG53蛋白。本发明的人源MG53在毕氏酵母中的诱导表达及纯化方法设计巧妙，能够高效表达人源MG53，通过层析纯化获得高纯度的重组蛋白，应用于神经细胞，肾小管上皮细胞，骨骼肌细胞、心肌细胞的损伤及肾脏损伤、肌肉损伤、心脏损伤的修复。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 损伤 修复 蛋白 酵母 中的 诱导 表达 纯化 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，根据人源MG53蛋白氨基酸序列及毕氏酵母密码子偏爱性，将经过密码子优化后的编码人源rhMG53(TRIM72)的核苷酸序列与HIS(6×his)标签连接，构建入酵母表达载体pHKY01中，然后转入毕氏酵母GS115，通过阳性克隆筛选，获得rhMG53(TRIM72)高表达量菌株GSY001，表达产物通过Ni‑镍亲和纯化柱层析获得纯化蛋白rhMG53(TRIM72)。
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