[发明专利]一种生产番茄红素重组菌的构建方法与应用有效
| 申请号： | 201610864886.3 | 申请日： | 2016-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN106434506B | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 张学礼;李清艳;唐金磊;毕昌昊 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P5/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产番茄红素重组菌的构建方法与应用。本发明提供了重组菌，为如下1)‑3)中任一种：1)为提高产番茄红素大肠杆菌中(E)‑4‑羟基‑3‑甲基‑2‑丁烯基‑焦磷酸合成酶基因ispG和(E)‑4‑羟基‑3‑甲基‑2‑丁烯基‑焦磷酸还原酶基因ispH的表达和/或活性，得到重组菌；2)为调控1)所示重组菌的crt操纵子表达和/或活性，得到的重组菌；3)为调控2)所示重组菌的glpD基因表达和/或活性，得到的重组菌。本发明的实验证明，在具有一定萜类化合物合成能力的重组大肠杆菌中，协调表达ispG和ispH基因，可以有效提高重组大肠杆菌的萜烯类化合物合成能力，包括β‑胡萝卜素和番茄红素，以及其它萜烯类化合物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 番茄 重组 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.重组菌，为如下1）-3）中任一种：/n1）为提高含有crt操纵子且产番茄红素的大肠杆菌中(E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基-焦磷酸合成酶基因ispG和(E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基-焦磷酸还原酶基因ispH的表达和/或活性，得到重组菌；/n2）为调控1）所示重组菌的crt操纵子表达和/或活性，得到的重组菌；/n3）为调控2）所示重组菌的glpD基因表达和/或活性，得到的重组菌；/n所述提高产番茄红素大肠杆菌中(E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基-焦磷酸合成酶基因ispG和(E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基-焦磷酸还原酶基因ispH的表达和/或活性为通过如下（1）或（2）实现：/n（1）将所述产番茄红素大肠杆菌中的ispG基因前插入启动ispG基因表达的序列23所示的调控元件mRSL-4:: ispG，且将所述产番茄红素大肠杆菌中的ispH基因前插入启动ispH基因表达的序列32所示的mRSL-14:: ispH；/n（2）将所述产番茄红素大肠杆菌中的ispG基因前插入启动ispG基因表达的序列21所示的mRSL调控元件mRSL-1:: ispG，且将所述产番茄红素大肠杆菌中的ispH基因前插入启动ispH基因表达的序列32所示的mRSL-14:: ispH；/n所述调控1）所示重组菌的crt操纵子表达和/或活性为将1）所示重组菌中的crt操纵子的启动子替换为诱导型启动子；/n所述调控2）所示重组菌的glpD基因表达和/或活性为将2）所示重组菌中的glpD基因的启动子替换成人工调控元件M1-46。/n
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