[发明专利]一种优化的pBBR1MCS系列载体及其应用有效
申请号: | 201610867175.1 | 申请日: | 2016-09-30 |
公开(公告)号: | CN106434722B | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 李慧;朱虎;孙亚杰;焦学;周万龙;李菁 | 申请(专利权)人: | 中国石油大学(华东) |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/74;C12N15/66 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266580 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开一种优化的表达载体,该载体是利用融合PCR技术,将pBBR1MCS系列广宿主克隆载体的骨架同表达载体pGEX4T‑1的启动子、调控序列LacIq以及终止序列相连,以替换pBBR1MCS质粒的lac启动子、LacZα编码序列和终止序列;同时,对该载体的多克隆位点进行了修饰,该位点包括了Xho I、Sma I、Spe I等酶切位点,还引入了Bgl II的酶切位点,便于基因的功能鉴定和克隆。将该载体转入大肠杆菌,可有效在该菌株中复制并表达外源蛋白,并且有利于外源蛋白的正确折叠,使其形成有活性的蛋白。 | ||
搜索关键词: | 一种 优化 pbbr1mcs 系列 载体 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种获得优化的表达载体pBBRtac的方法,其特征在于,改造pBBR1MCS系列载体,将所述pBBR1MCS系列载体的LacZα短肽编码基因、lac启动子替换成来源于pGEX4T‑1的Ptac启动子及其调控序列LacIq。
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