[发明专利]一种基于生物碱的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法

摘要

本发明提供了一种基于生物碱的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法。以新鲜烟叶中烟碱烯和4,4′‑二联吡啶含量的比值为指标，对代谢组学新鲜烟叶样品质量进行判别，为代谢组学合格样品的选择提供依据。本发明准确可靠，简单可行，可为烟草代谢特征分析及相关烟草代谢组学研究提供借鉴。

主权项

一种基于生物碱的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：通过检测新鲜烟叶中烟碱烯和4,4'‑二联吡啶含量，计算其比值，对代谢组学研究中的新鲜烟叶样品质量进行判别；具体步骤如下：a、称取新鲜烟叶冻干样品100~150 mg，加入0.83~1.75 mL5％氢氧化钠溶液，湿润试样，静置15min，加入10mL 0.01%的三乙胺的甲基叔丁基醚溶液和含内标的提取溶剂，加盖后置于摇床上室温振荡萃取1.5~2小时后离心，移取4~7mL上清液并浓缩10倍，进GC/MS分析，采用保留时间和选择离子SIM模式定性，检测生物碱的含量；b、GC/MS分析方法的气相色谱参数：色谱柱：DB‑35MS，30 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm d.f. ；程序升温：以8 ℃/min的速度从100 ℃升至260 ℃，保持10min；载气：氦气；柱流速：1.0 mL/min；进样口温度：250 ℃；进样量 2 µL，分流进样，分流比 10:1；c、GC/MS分析方法的质谱参数：溶剂延迟：8 min；电离电压：70 ev；离子源温度：230 ℃；传输线温度：280 ℃；扫描方式：选择离子模式SIM，选择离子如下：内标2‑甲基喹啉 143，烟碱84，降烟碱119，麦斯明146，假木贼碱84，烟碱烯158，新烟碱 160，2,3′‑二联吡啶156，4,4′‑二联吡啶156，可的宁176，N‑甲酰基降烟碱176，烟碱‑1‑氧代84，内标D8 ‑二联吡啶164。