[发明专利]液相色谱保留指数的建立及其在化合物定性方面的应用有效
申请号: | 201610868642.2 | 申请日: | 2016-09-30 |
公开(公告)号: | CN106442787B | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 陈霞;陈千思;郑庆霞;刘萍萍;周会娜;金立锋;王燃;张慧;申晓晔;李泽锋 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 郑州中民专利代理有限公司 41110 | 代理人: | 郭中民;许延丽 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明提供一种液相色谱保留指数的建立及其在化合物定性方面的应用。具体步骤如下:a、配制保留指数标记物的混合溶液;b、标准色谱条件下,LC‑MS/MS进行标记物的检测并确定其保留指数值;c、新鲜烟叶液氮速冻,冷冻干燥并粉碎;d、粉碎好的样品加入提取溶剂,低温超声提取;e、冷冻离心,取上清液并过滤;f、LC‑MS/MS检测上述上清液,并对溶液中所含化合物进行定性分析。本发明通过保留指数标记物实现复杂样品溶液中化合物组分的保留时间校正,避免了流动相﹑压力或使用批号不同的色谱柱所带来的保留时间的变化,与现有的方法相比,不需要多次同条件实验,过程简单、成本较低,可使定性的准确性和唯一性大大提高。 | ||
搜索关键词: | 色谱 保留 指数 建立 及其 化合物 定性 方面 应用 | ||
【主权项】:
1.一种液相色谱保留指数的建立及其在化合物定性方面的应用,其特征在于:在液相色谱中引入保留指数的概念,并通过氘代标记物或卤代标记物实现待测化合物保留时间的校正;校正的具体方式:在标准色谱分析条件下,测定氘代标记物的保留时间,并设定其保留指数,所述的保留指数标记物的保留指数的换算方法为1秒换算为RI 15,根据实验所测保留时间进行换算;所述保留指数标记物为氟苯甘氨酸、D3‑蛋氨酸、D3‑亮氨酸、D8‑苯丙氨酸、D5‑色氨酸、D5‑马尿酸、Cl‑苯丙氨酸、D5‑吲哚乙酸、D9‑孕酮、D4‑邻苯二甲酸二辛酯,其中氟苯甘氨酸和Cl‑苯丙氨酸属于卤代标记物,其它为氘代标记物,它们的保留时间分布均匀;所述待测化合物组分的保留值用相邻两个组分的保留指数标记物来标定,其计算公式如下:RI(x)=RI(z)+[RI(z+1)‑RI(z)]×[Rt(x)‑Rt(z)]/[Rt(z+1)‑Rt(z)],式中Z和Z+1分别为目标化合物X流出前后的保留指数标记物的流出时间Rt和保留指数RI,这里Rt(z)
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