[发明专利]一种基于有机酸的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法

摘要

本发明提供了一种基于有机酸的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，该方法以新鲜烟叶样品中十七酸和丁酸含量的比值为指标，对代谢组学新鲜烟叶样品质量进行判别，为代谢组学合格样品的选择提供依据。本发明准确可靠，简单可行，可为烟草代谢特征分析及相关烟草代谢组学研究提供借鉴。

主权项

1.一种基于有机酸的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：通过检测新鲜烟叶中十七酸和丁酸的含量，计算其比值，对代谢组学研究中的新鲜烟叶样品质量进行判别；所述计算其比值是以十七酸和丁酸含量的比值为指标，建立区分代谢组学正常样品及褐化样品的标准，即待测样品中十七酸和丁酸含量的比值在9以下的为合格样品，可用于烟草代谢组学分析，十七酸和丁酸含量的比值在9以上的为变质的不合格样品，不可用于烟草代谢组学分析；具体方法如下：1）称取20~25mg冷冻研磨后的新鲜烟叶置于螺口耐压试管中，加入二氯甲烷/乙腈体积比为1:2的混合溶液1mL，加盖密封后置于超声波发生器内室温下超声萃取30min，静置取上清夜，过 0.45µm滤膜，加入BSTFA 100µL，60℃衍生40min，进GC/MS分析，检测有机酸含量；2）GC/MS分析方法的气相色谱参数：色谱柱：DB‑5MS，规格为：50 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm d.f. ；程序升温：以4℃/min的速度从50℃升至280℃，保持20 min；载气：氦气；柱流速：1.0 mL/min；进样口温度：280℃；进样量 2 µL，分流进样，分流比 10:1；3）GC/MS分析方法的质谱参数：溶剂延迟：4 min；电离电压：70 ev；离子源温度：230 ℃；传输线温度：280 ℃；扫描方式：选择离子模式（SIM），选择离子如下：甲酸（103），乙酸（117），丁酸（145），乳酸（147），己酸（173），反‑2‑己烯酸（IS）（171），庚酸（187），辛酸（201），丁二酸（147）， 壬酸（215），苹果酸（147），柠檬酸（147），十二酸（257），十四酸（285），十五酸（299），十六酸（313），十七酸（327），亚油酸（337），亚麻酸（335），油酸（339），十八酸（341）。