[发明专利]一种基于色素的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法

摘要

本发明提供了一种基于色素的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，该方法以新鲜烟叶样品中胡萝卜素与叶绿素b含量的比值为指标，对代谢组学新鲜烟叶样品质量进行判别，为代谢组学合格样品的选择提供依据。相比现有技术，本发明具有操作简单快速、结果准确可靠、样品用量少的优点，可为烟草代谢特征分析及相关烟草代谢组学研究提供借鉴。

主权项

1.一种基于色素的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：通过检测新鲜烟叶中胡萝卜素与叶绿素b含量，计算其比值，对烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量进行判别；判别条件：以胡萝卜素与叶绿素b含量的比值为指标，建立区分代谢组学正常样品及褐化样品的标准，即待测样品中胡萝卜素与叶绿素b含量的比值在0.19以上的为合格样品，用于烟草代谢组学分析，胡萝卜素与叶绿素b含量的比值在0.19以下的为变质的不合格样品，不可用于烟草代谢组学分析；具体步骤如下：a、称取新鲜烟叶冻干样品0.2~0.4g，加入25~50mL萃取剂，冰浴下超声波萃取20~40 min，取萃取液经0.45µm微膜过滤器过滤，滤液装入棕色色谱瓶，待HPLC分析；b、液相色谱的条件为：色谱柱Waters Nova‑Pak‑C18，规格为：3.9×150mm，4µm；柱温30℃；柱流速0.5 mL/min；进样量10µL；流动相 A：异丙醇；流动相 B：80％乙腈的水溶液（V/V）；平衡时间6min；梯度洗脱：0 min，100%B；40 min，0%B；叶绿素b检测波长428nm，其它质体色素检测波长为448nm；采用保留时间结合标样的吸收光谱定性，外标法定量；c、通过标准曲线计算得出胡萝卜素和叶绿素b的含量。