[发明专利]一种从动物肺中提取肝素钠的方法及该肝素钠

摘要

本发明公开了一种从动物肺中提取肝素钠的方法及该肝素钠，是以动物肺为原料，经过绞碎打浆、酶解脱脂、盐解提取、酶解除蛋白、树脂吸附与洗脱、调酸碱除蛋白、沉淀脱盐、复沉精制、脱水干燥制得肝素钠。本发明在动物肺肝素钠萃取、纯化过程中，采用盐解与酶解相结合，酸处理与碱处理相结合，树脂提纯与乙醇分级沉淀相结合工艺，最大限度地使肝素与蛋白质、软骨素等杂质解离，较为彻底地去除了与肝素紧密结合的蛋白质、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等杂质，具有工艺简单、成本低廉、提取效果好、适合大规模工业化生产的特点。所制备的肝素钠纯度好，效价高，收率高，平均效价达到120U/mg以上，平均每公斤动物肺提取肝素钠效价达到22万单位以上。

主权项

一种从动物肺中提取肝素钠的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）绞碎打浆：动物肺经预处理、绞碎、匀浆后加水，搅拌混匀，得到肺浆液；（2）酶解脱脂：用NaOH调节步骤（1）中的肺浆液的pH值至8.5 ‑9.2，升温至40‑45℃，加入脂肪酶，保温酶解，过滤，收集滤渣，加水搅拌得脱脂肺浆液；（3）盐解提取：往步骤（2）中的脱脂肺浆液中加入氯化钠，调节pH值，升温至50‑55℃并保温，再升温并进行过滤，得到盐解液；（4）酶解除蛋白：将步骤（3）中的盐解液降温至55℃，调节pH值至8.0‑9.0，加入蛋白酶，保温酶解，然后升温灭酶并进行过滤，得到酶解液；（5）吸附：将步骤（4）中的酶解液降温至60℃，调整其盐度和pH值，加入D‑254树脂，保温吸附处理10‑12小时后，收集吸附后的树脂；（6）洗脱：（6‑1）：用水反复冲洗步骤（5）中的吸附后的树脂至水变清为止，滤干树脂，再以完全浸没树脂为量，加入质量分数为5‑7%的氯化钠溶液，温度保持在50‑55℃，搅拌30‑60min，滤干得洗涤后的树脂；（6‑2）：以完全浸没步骤（6‑1）中的洗涤后的树脂为量，加入质量分数为20‑25%的氯化钠溶液，温度保持在50‑55℃，搅拌3‑4小时后，分离树脂，收集洗脱液；（6‑3）：重复步骤（6‑2）一次，将两次收集的洗脱液合并，并用100目滤袋过滤，收集洗脱液待用；（7）调酸除蛋白：往步骤（6‑3）中的洗脱液加入其重量0.1‑0.3%的保护剂搅拌均匀后，用稀盐酸调节pH值至3.0‑3.5，静置10分钟，用100目滤袋过滤，收集滤液待用；（8）调碱除蛋白：用NaOH调节步骤（7）中的滤液的pH值至11.0，搅拌均匀后静置30分钟，用100目滤袋过滤，收集滤液待用；（9）沉淀脱盐：用稀盐酸调节步骤（8）中的滤液的pH值至7.0‑8.0，加入其体积1.8‑2.2倍的质量分数为80‑85%的预冷过的乙醇，搅拌均匀后密封沉淀18‑24小时，倾出上层乙醇清液，收集沉淀物待用；（10）复沉精制：（10‑1）：往步骤（9）中的沉淀物中加入其重量10倍的质量分数为3%的氯化钠溶液，搅拌溶解后,升温至80℃并保温，然后降温并进行过滤，收集滤液，加入乙醇，静置，收集沉淀物；（10‑2）：往步骤（10‑1）中的沉淀物中加入其重量10倍的质量分数为3%的氯化钠溶液，充分搅拌溶解后,升温至80℃并保温，然后降温并进行过滤，收集滤液，加入乙醇，静置，收集沉淀物；（11）脱水干燥：往步骤（10‑2）中的沉淀物中加入其重量2倍的质量分数为95‑100%的乙醇脱水2‑3次，收集沉淀物，置于60‑70℃下干燥10‑15小时即得肝素钠。