[发明专利]牙龈间充质干细胞的原代分离方法在审

专利信息
申请号: 201610873021.3 申请日: 2016-09-30
公开(公告)号: CN106244533A 公开(公告)日: 2016-12-21
发明(设计)人: 陈海佳;王一飞;葛啸虎;林正梅;戚康艺 申请(专利权)人: 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司11227 代理人: 赵青朵
地址: 510000 广东省广州市开发区广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及细胞领域,特别涉及牙龈间充质干细胞的原代分离方法。本发明采用二次消化法,在第一次酶解的基础上,对仍未消化的组织块,采用胰蛋白酶进行第二次酶解,提高了细胞的收获率,减少细胞丢失。本发明使用的GMSCs完全培养基不含有动物源血清,避免了引入污染和过敏原的风险,与常规使用的含胎牛血清细胞培养基相比具有更高的临床安全性。
搜索关键词: 牙龈 间充质 干细胞 分离 方法
【主权项】:
一种牙龈间充质干细胞的原代分离方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:获得牙龈组织,漂洗;步骤2:取步骤1获得的漂洗后的牙龈组织,剪碎后与消化酶组合物混合后消化,洗涤,收集细胞;步骤3:取步骤2中过滤后的未消化的牙龈组织与胰蛋白酶混合后消化,离心,洗涤,收集细胞;步骤4:取步骤2获得的细胞与步骤3获得细胞混合,用培养基重悬后培养,纯化;步骤2中所述消化酶组合物为Ⅰ型胶原酶‑Dispase酶混合消化液。
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