[发明专利]牙龈间充质干细胞的原代分离方法在审
申请号: | 201610873021.3 | 申请日: | 2016-09-30 |
公开(公告)号: | CN106244533A | 公开(公告)日: | 2016-12-21 |
发明(设计)人: | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;林正梅;戚康艺 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市开发区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及细胞领域,特别涉及牙龈间充质干细胞的原代分离方法。本发明采用二次消化法,在第一次酶解的基础上,对仍未消化的组织块,采用胰蛋白酶进行第二次酶解,提高了细胞的收获率,减少细胞丢失。本发明使用的GMSCs完全培养基不含有动物源血清,避免了引入污染和过敏原的风险,与常规使用的含胎牛血清细胞培养基相比具有更高的临床安全性。 | ||
搜索关键词: | 牙龈 间充质 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】:
一种牙龈间充质干细胞的原代分离方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:获得牙龈组织,漂洗;步骤2:取步骤1获得的漂洗后的牙龈组织,剪碎后与消化酶组合物混合后消化,洗涤,收集细胞;步骤3:取步骤2中过滤后的未消化的牙龈组织与胰蛋白酶混合后消化,离心,洗涤,收集细胞;步骤4:取步骤2获得的细胞与步骤3获得细胞混合,用培养基重悬后培养,纯化;步骤2中所述消化酶组合物为Ⅰ型胶原酶‑Dispase酶混合消化液。
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